9046-27-9
中文名稱
γ-谷氨酰轉移酶
英文名稱
EC 2.3.2.2
CAS
9046-27-9
更新日期
2026/07/10 10:16:21
基本信息
中文別名
Γ谷氨酰轉肽酶Γ-谷氨酰轉移酶
Γ-谷氨酰轉肽酶
Γ-谷氨酰轉移酶
GAMMA-谷氨酰轉移酶
Γ-谷氨?;D氨酶(牛腎)
Γ-谷氨酰轉肽酶 來源于馬腎臟
Γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺單鹽
Γ-谷氨酰-3-羥基-4-硝基苯胺單胺鹽
Γ-谷谷氨酰轉移酶(催化濃度)(低溫運輸)
英文別名
GGTPEC 2.3.2.2
GGTP TYPE VI
GGTP TYPE IV
GAMMA-GT TYPE IV
GAMMA-GT TYPE VI
GLUTAMYL TRANSFERASE
L-Glutamyltransferase
γ-glutamyltransferase
g-Glutamyltranspeptidase
所屬類別
分析化學:標準物質安全數(shù)據(jù)
常見問題列表
生理作用
γ-谷氨酰轉肽酶又稱γ-谷氨酰轉移酶、GGT、γ-GT、EC 2.3.2.2,是一種轉移酶,在γ-谷氨酸官能團從谷胱甘肽等分子上轉移至受體時起催化作用,受體可能是一種氨基酸、一種肽或水。γ-谷氨酰轉肽酶在γ-谷氨酰循環(huán)中起著關鍵作用。許多人體組織中都有γ-谷氨酰轉肽酶,例如肝臟。 操作步驟
1. 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。 2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3. 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。 4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。 5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。 8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 9. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。檢測原理
本試劑盒應采用雙抗體夾心法測定標本中小鼠γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)水平。用純化的γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入γ-谷氨酰轉肽酶(GGT),再與HRP標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)含量。樣本
1.?血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。 2.?血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。用途
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)的含量。
