三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽(TCEP-HCl)性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
三(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽(TCEP鹽酸鹽)是一種新型的巰基化DNA的還原劑和去保護劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體，特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯(lián)反應(yīng)實驗(如DNA在生物感應(yīng)器中的固定)的效率；而在DNA溶液中加入三(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽(TCEP鹽酸鹽)，反應(yīng)一段時間后除去，就可以降低DNA的二聚化。
三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽為有機磷化合物，可用作水溶性試劑，用于二硫化物的選擇性還原；在質(zhì)譜應(yīng)用中比 DTT 更穩(wěn)定；也可用于在水中進行的二硫化物選擇性還原。
TCEP hydrochloride (Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride) 是一種非硫醇還原劑，比其他化學(xué)還原劑更穩(wěn)定并且產(chǎn)生更快的 S-S 還原反應(yīng)。TCEP hydrochloride 是一種三烷基膦，可選擇性地減少蛋白質(zhì)的分解，而不會改變其性質(zhì)或與反應(yīng)混合物中的硫醇導(dǎo)向劑發(fā)生相互作用。TCEP hydrochloride 還是 DNA/AuNP 化學(xué)中常用的還原劑。
TCEP hydrochloride has been introduced which o?ers the prospect of serving as an alternative to the more commonly employed DTT in the NF-κB-DNA binding reactions in vitro, using recombinant p50 protein and a
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P-labelled κB oligonucleotide. DTT promotes NF-κB-DNA binding in concentrations from 0.25 to 2.6 mM in binding reactions. However, in the presence of 0.25 mM DTT, inhibition of NF-κB binding is seen only at Hg
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concentrations greater than 100 μM and results are highly variable. In contrast, TCEP hydrochloride promotes NF-κB-DNA binding in a dose-related manner in concentrations from 0.25 to 6 mM. In the presence of even 6 mM TCEP hydrochloride, Hg
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prevents NF-κB-DNA binding at concentrations as low as 20 μM in binding reactions.
The human lactoferrin (hLF) peptide is dissolved in phosphate buffer to a concentration of 0.1 mm. Reduction of the disulfide bonds is obtained by adding a 30-fold molar excess of TCEP hydrochloride with subsequent incubation for 2 h at 37 ℃.
TCEP還原劑在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)。-80°C 儲存時，請在 6 個月內(nèi)使用，-20°C 儲存時，請在 1 個月內(nèi)使用。
用途
水溶性試劑，用于二硫化物的選擇性還原。在質(zhì)譜應(yīng)用中比 DTT 更穩(wěn)定。
用于在水中進行的二硫化物選擇性還原。
堿化后，該水溶性配體可通過水性洗滌反應(yīng)粗產(chǎn)物實現(xiàn)釕系復(fù)分解催化劑的簡單去除。
生產(chǎn)方法
以3,3',3''-磷三基三丙酸三乙酯為原料合成三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽的一般步驟如下：將預(yù)先制備的3,3',3''-膦三苯基丙酸三甲酯（92.5g，0.28mol）置于250ml反應(yīng)燒瓶中，在機械攪拌下加入摩爾比為12:1的鹽酸（120ml，1.44mol）。將反應(yīng)混合物加熱至90℃，直至固體完全溶解，繼續(xù)在此溫度下反應(yīng)4小時。反應(yīng)完成后，用冰水浴冷卻并攪拌，使白色固體沉淀析出。通過過濾分離固體，濾餅用蒸餾水洗滌，得到白色三(2-羧乙基)磷鹽酸鹽。產(chǎn)物經(jīng)干燥后，稱重為61.3g，收率為82.4%。
參考文獻：
[1] Patent: CN103232487, 2016, B. Location in patent: Paragraph 0040; 0041
三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽(TCEP-HCl)
上下游產(chǎn)品信息
上游原料
下游產(chǎn)品