背景[1-3]
DMEM不含酚紅是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養(yǎng)基最初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)，不含葡萄糖的DMEM培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要，隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，方便快捷。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值7.2～7.4時為紅色，最適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類激素（特別是雌激素）的作用，因此在用到雌激素敏感的細(xì)胞時（如乳腺組織），使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細(xì)胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。
L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。
應(yīng)用[4][5]
用于富血小板纖維蛋白對牙周膜前體細(xì)胞成骨分化的影響及機(jī)制研究
以PRF+成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基和PRF+DMEM培養(yǎng)基為實驗組培養(yǎng)條件，以成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基和普通DMEM培養(yǎng)基為對照組培養(yǎng)條件，觀察不同培養(yǎng)條件對3種口腔前體細(xì)胞即PDLPCs、牙囊前體細(xì)胞（Dental Follicle Progenitor Cells，DFPCs）和牙槽骨前體細(xì)胞（Alveolar Bone Progenitor Cells，ABPCs）生物學(xué)行為的影響。
結(jié)果顯示，在PRF與前體細(xì)胞的共培養(yǎng)中，PDLPCs呈放射狀附著于PRF邊緣，而DFPCs和ABPCs則與PRF邊緣無附著。PDLPCs在PRF表面可以充分伸展，并伸出細(xì)小突起進(jìn)入PRF纖維網(wǎng)絡(luò)。
細(xì)胞遷移和增殖實驗顯示PRF對3種口腔前體細(xì)胞的遷移和增殖均有顯著的呈劑量依賴性的促進(jìn)作用（P<0.01），分別產(chǎn)生約9-24倍的遷移增加和約30-90%的增殖提高，其中對PDLPCs和DFPCs的作用最強(qiáng)，對ABPCs的作用相對較弱。
在細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)實驗中，可見成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基、PRF+成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基和PRF+DMEM均具有促進(jìn)細(xì)胞成骨分化的作用，其中PRF+成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基的作用最強(qiáng)，其次為成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基，而PRF單獨(dú)應(yīng)用，也對ABPCs和PDLPCs產(chǎn)生了成骨誘導(dǎo)作用，但對DFPCs的作用很弱。
說明PRF對前體細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)作用具有一定的細(xì)胞特異性。體內(nèi)研究顯示，在沒有復(fù)合細(xì)胞的情況下，PRF會被機(jī)體新生的膠原組織在短時間內(nèi)替代和降解。但是復(fù)合了PDLPCs后，復(fù)合物在體內(nèi)經(jīng)過21天并未完全消失，組織學(xué)染色見PRF結(jié)構(gòu)消失，取而代之的是致密的結(jié)締組織團(tuán)塊，其中的細(xì)胞排列規(guī)則，呈長梭形，類似于成纖維細(xì)胞。
但是，當(dāng)PDLPCs/PRF復(fù)合物移植如動物顱骨缺損時，8周后缺損被新生組織完全封閉，且新生組織的μ-CT灰度與骨組織一致。VonKossa染色可見組織內(nèi)存在大量礦化。
參考文獻(xiàn)
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