背景[1-3]
T淋巴細胞分化蛋白MAL2抗體是一類可以特異性結(jié)合T淋巴細胞分化蛋白MAL2的多克隆抗體,主要用于體外檢測T淋巴細胞分化蛋白MAL2的免疫學(xué)實驗。
T細胞主要在胸腺內(nèi)發(fā)育。當(dāng)來自胚肝或骨髓的T祖細胞(pro—t)進入胸腺后.會歷經(jīng)受到高度調(diào)節(jié)的發(fā)育過程,其間TCRaβ、CD3以及協(xié)同受體CD4和CD8等分子的表達水平不同。成熟T細胞移出胸腺,分布于血液和外周淋巴組織,執(zhí)行特異細胞免疫和免疫調(diào)節(jié)功能。

T淋巴細胞分化蛋白MAL2抗體
骨髓中定向分化為T細胞的祖細胞,在進入胸腺之前或進入胸腺被膜下尚未到達胸腺皮質(zhì)前又稱前胸腺(prethymic)淋巴細胞(Pre-T)。Pre—T從進入胸腺皮質(zhì)后至離開胸腺前,稱為胸腺細胞(thymocyte),成熟的胸腺細胞進入外周血液和外周淋巴組織中稱為T細胞。Pre-T細胞在胸腺上皮微環(huán)境下不斷分化和發(fā)育.從皮質(zhì)外層(outercortex)進入皮質(zhì)深層,進一步發(fā)育為cD4一和CD8雙陰性細胞(DN)(其表型為CD3+、CD4-、CD8一、CD25一、TCRaβ一),但其TCRaβ-CD3可表達于細胞表面.與基質(zhì)細胞配基結(jié)合后,誘導(dǎo)CD4/CD8分子表達。
由此使T細胞發(fā)育進入雙陽性(CD4+、CD8+)細胞(double posltive,DP)階段,通過皮髓連接處進入髓質(zhì),并發(fā)生胸腺內(nèi)的選擇過程,分化發(fā)育為具有免疫功能的成熟T細胞,只表達cD4一或cD8‘,故稱為單陽性細胞(single positive,SP)。成熟胸腺細胞大部分通過皮髓連接處的毛細血管后靜脈進入血液。
應(yīng)用[4][5]
用于RSV非結(jié)構(gòu)蛋白對支氣管上皮細胞驅(qū)動的T淋巴細胞分化的影響研究
人呼吸道合胞病毒(RSV)是引起嚴(yán)重性呼吸道疾病的主要原因之一,是引起后繼哮喘發(fā)生的重要危險因素。篩選RSV的2個非結(jié)構(gòu)蛋白NS1和NS2在支氣管上皮中的相互作用蛋白,檢測其誘發(fā)支氣管上皮細胞異常信號轉(zhuǎn)導(dǎo),從而探究其驅(qū)動T淋巴細胞亞群漂移機制。
方法:構(gòu)建含NS1或NS2基因的過表達慢病毒載體感染支氣管上皮細胞,免疫共沉淀法和質(zhì)譜法篩選并鑒定其相互作用蛋白;Western blot法鑒定相互作用蛋白泛素化修飾;亞硫酸鹽測序檢測Notch1基因甲基化;支氣管上皮細胞與CD4+T淋巴細胞共培養(yǎng),流式細胞術(shù)檢測CD4+T淋巴細胞亞群分化,ELISA法檢測共培養(yǎng)體系上清中細胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17表達。
結(jié)果:(1)NSl與組蛋白H2BD相互作用,NS1與組蛋白H2BD相互作用的關(guān)鍵區(qū)域是NS1延伸蛋白C區(qū);(2)NS1與組蛋白H2BD相互作用誘導(dǎo)組蛋白H2BD單泛素化修飾;(3)NS1誘導(dǎo)Notch1去甲基化改變;(4)NS1對支氣管上皮細胞驅(qū)動的T淋巴細胞亞群分化無影響,NS2可抑制Th17的分化,該效應(yīng)可被泛素化酶抑制劑所逆轉(zhuǎn)。(5)病毒非結(jié)構(gòu)蛋白對共培養(yǎng)體系上清中細胞因子分泌無影響。
參考文獻
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[2]Microbial Heat Shock Protein 65 Attenuates Airway Hyperresponsiveness and Inflammation by Modulating the Function of Dendritic Cells[J].Yoo Seob Shin,Katsuyuki Takeda,Yoshiki Shiraishi,Yi Yeong Jeong,Joanne Domenico,Yi Jia,Junyan Han,Ralf Spallek,Mahavir Singh,Joseph J.Lucas,Erwin W.Gelfand.The Journal of Immunology.2012(7)
[3]Blocking the NOTCH Pathway Inhibits Vascular Inflammation in Large-Vessel Vasculitis[J].Circulation.2011(3)
[4]Nuclear Trafficking and Regulation of Innate Immunity by Respiratory Syncytial Virus(RSV)NS1 protein[J].S.Boyapalle,W.Zhang,X.Cao,R.F.Lockey,S.S.Mohapatra.The Journal of Allergy and Clinical Immunology.2009(2)
[5]彭丹.RSV非結(jié)構(gòu)蛋白對支氣管上皮細胞驅(qū)動的T淋巴細胞分化的影響[D].中南大學(xué),2013.