背景[1][2][3][4]
Recombinant Rat Eotaxin-2CCL24中趨化因子（CC基序）配體24（CCL24），也稱為骨髓祖抑制因子2（MPIF-2）或嗜酸性粒細胞趨化蛋白2（eotaxin-2）是一種蛋白質(zhì)，在人中由編碼CCL24基因。該基因位于人類7號染色體上。Eotaxin，也稱為MPIF-2和Ckß6，是最近發(fā)現(xiàn)的新型CC趨化因子。它由活化的單核細胞和T淋巴細胞產(chǎn)生。
嗜酸性粒細胞趨化因子-2選擇性地化學(xué)表達CCR3的細胞，包括嗜酸性粒細胞，嗜堿性粒細胞，Th2T細胞，肥大細胞和某些樹突細胞亞群。另外，Eotaxin-2抑制多能造血祖細胞的增殖。成熟蛋白質(zhì)還包括C末端截短，含有78個氨基酸殘基（小鼠同源物為92個氨基酸殘基，沒有C末端截短）。CCL24是屬于CC趨化因子家族的小細胞因子。
CCL24與之交互趨化因子受體CCR3，以誘導(dǎo)趨化性在嗜酸性粒細胞。這種趨化因子對靜息T淋巴細胞也具有強烈的趨化作用，對中性粒細胞也具有輕微的趨化作用。趨化因子是一組有趨化功能的可溶性細胞因子,通常由70-90個氨基酸組成。通過與細胞膜上相應(yīng)的G蛋白耦聯(lián)受體結(jié)合,趨化因子在淋巴細胞的募集和活化等免疫反應(yīng)過程中發(fā)揮著重要作用。
到目前為止,在人體已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大約50種趨化因子以及相應(yīng)的約18種趨化因子受體。依據(jù)其結(jié)構(gòu)中半胱氨酸殘基位點的不同,趨化因子被分為CXCL、CCL、C和CX3C四大亞家族。趨化因子CCL24屬于嗜酸性粒細胞選擇性趨化和激活因子eotaxins類分子,也被稱為eotaxin2或MPIF-2(myeloid progenitor inhibitory factor2)。CCL24與唯一受體CCR3結(jié)合后,在人體廣泛參與過敏性疾病、寄生蟲感染、系統(tǒng)性疾病等多種免疫相關(guān)疾病的發(fā)病過程。
臨床應(yīng)用[5]
Recombinant Rat Eotaxin-2CCL24中大鼠模型胚胎發(fā)育功能CCL24的作用及機制研究發(fā)現(xiàn)，早孕期母胎界面表達有趨化因子CCL24, CCL24與受體CCR3結(jié)合可能參與子宮內(nèi)膜蛻膜化、胚胎種植以及母胎免疫耐過程的形成,并發(fā)揮一定的調(diào)節(jié)作用。母胎界面局部CCL24和CCR3的表達和功能調(diào)節(jié)在母胎界面的表達特征有重大意義意義。
研究方法將蛻膜基質(zhì)細胞(DSCs, decidual stromal cells)與Tros細胞共培養(yǎng)48h,檢測Tros分泌CCL24以及表達CCR3水平的變化。在體外,rhCCL24處理Tros48h后,BrdU增殖實驗檢測Tros細胞增殖情況,MTT比色法檢測Tros細胞活力,侵襲實驗了解Tros細胞侵襲力的變化。IHC結(jié)果顯示,絨毛組織表達中等水平的CCL24,并高表達CCR3受體。ELISA檢測Tros細胞體外培養(yǎng)24-96h不同時段的上清,我們發(fā)現(xiàn)Tros細胞上清中存在CCL24蛋白,其含量隨時間增加而降低。FCM檢測Tros細胞膜上CCR3表達水平為(10.79±0.82)%。
等比例DSCs與Tros共培養(yǎng)48h后,CK7+Tros占總細胞數(shù)的(21.33±4.21)%。共培養(yǎng)上清中CCL24分泌的水平增加,結(jié)果有顯著差異。共培養(yǎng)后,Tros細胞表面的CCR3表達水平也明顯增加,至(57.15±11.27)%。在體外,rhCCL24促進Tros細胞的增殖和細胞活力,并以1ng/ml效果最明顯。另外,rhCCL24呈劑量依賴性抑制Tros的侵襲能力,高濃度時抑制作用最顯著。結(jié)論本課題的原代滋養(yǎng)細胞培養(yǎng)方法能得到較高純度的Tros細胞。
早孕期母胎界面的Tros細胞可分泌趨化因子CCL24,并表達其受體CCR3,提示在母胎界面CCL24/CCR3可能通過自分泌方式調(diào)解自身的生物學(xué)功能,從而參與胚胎種植和胎盤形成過程。Tros與DSCs共培養(yǎng),可模擬母胎界面Tros與DSCs直接接觸狀態(tài)。共培養(yǎng)系統(tǒng)中CCL24的分泌水平增加,DSCs能促進Tros細胞膜上CCR3的表達。
CCL24促進Tros細胞增殖和細胞活力,利于胚胎種植和胎盤形成。同時,CCL24又抑制Tros細胞侵襲能力,控制滋養(yǎng)細胞侵入過度引起滋養(yǎng)細胞相關(guān)疾病。因此,CCL24在胚胎種植過程中可調(diào)控滋養(yǎng)細胞侵入蛻膜的程度,從而發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)作用。
參考文獻
1. Patel VP,Kreider BL,Li Y,Li H,Leung K,Salcedo T,Nardelli B,Pippalla V,Gentz S,Thotakura R,Parmelee D,Gentz R,Garotta G(April 1997)."Molecular and functional characterization of two novel human C-C chemokines as inhibitors of two distinct classes of myeloid progenitors".J.Exp.Med.185(7):1163–72.doi:10.1084/jem.185.7.1163.PMC2196270.PMID9104803.
2. Hillier LW,Fulton RS,Fulton LA,et al.(July 2003)."The DNA sequence of human chromosome 7".Nature.424(6945):157–64.doi:10.1038/nature01782.PMID12853948.
3. White JR,Imburgia C,Dul E,Appelbaum E,O'Donnell K,O'Shannessy DJ,Brawner M,Fornwald J,Adamou J,Elshourbagy NA,Kaiser K,Foley JJ,Schmidt DB,Johanson K,Macphee C,Moores K,McNulty D,Scott GF,Schleimer RP,Sarau HM(November 1997)."Cloning and functional characterization of a novel human CC chemokine that binds to the CCR3 receptor and activates human eosinophils".J.Leukoc.Biol.62(5):667–75.PMID9365122.
4. Palikhe NS,Kim SH,Cho BY,Ye YM,Choi GS,Park HS(October 2009)."Genetic variability in CRTH2 polymorphism increases eotaxin-2 levels in patients with aspirin exacerbated respiratory disease".Allergy.65(3):338–346.doi:10.1111/j.1398-9995.2009.02158.x.PMID19796209.
5. 人早孕蛻膜組織及蛻膜基質(zhì)細胞趨化因子受體及配體的轉(zhuǎn)錄特征[J]. 賀銀燕,賀曉菊,李大金,郭培奮,周雯慧. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2007 (05)