T4 RNA Ligase，即T4 RNA連接酶，是一種ATP-依賴的可以催化單鏈RNA、單鏈DNA或單核苷酸分子間或分子內(nèi)5'-P末端與3'-OH末端之間形成磷酸二酯鍵的酶。
來源
重組 T4 RNA 連接酶由大腸桿菌表達(dá)，表達(dá)基因的來源為T4嗜菌體。
特性
（1）連接效率高
（2）活性強，穩(wěn)定性高，成本低
應(yīng)用
重組 T4 RNA 連接酶主要用于RNA和RNA之間的連接，連接時需要5'磷酸基團和3'羥基的存在。不僅可以進行RNA分子間的連接，也可以進行RNA分子(最短8個堿基)的環(huán)化連接。
重組 T4 RNA 連接酶可以用于RNA和單核苷酸之間的連接，單核苷酸必須為5'和3'均磷酸化的形式，此時常用于RNA的3'末端標(biāo)記。
其也可以用于DNA和RNA之間的連接。當(dāng)DNA提供5'磷酸基團，RNA提供3'羥基時，連接效率較高；當(dāng)DNA提供3'羥基，RNA提供5'磷酸基團時，連接效率非常低。
其也可以用于DNA和DNA之間的連接，但連接效率非常低。主要用于DNA的環(huán)化連接，例如5' RACE中的cDNA環(huán)化。DNA和DNA之間的連接盡管可以進行，但比較困難。