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T4噬菌體基因32編碼蛋白的應(yīng)用

2020/1/17 8:12:58

背景及概述[1]

T4噬菌體基因32編碼蛋白(T4 gene 32 protein)是一種單鏈 DNA(ssDNA)結(jié)合蛋白,為T4噬菌體DNA復(fù)制和修復(fù)所必需。它協(xié)調(diào)性地結(jié)合并穩(wěn)定瞬時(shí)形成的ssDNA區(qū)域,在T4 噬菌體DNA復(fù)制過程中起著重要的結(jié)構(gòu)性作用。該蛋白也被廣泛地用于穩(wěn)定和標(biāo)記ssDNA區(qū)域,以便用電子顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)DNA的結(jié)構(gòu)。最新報(bào)道表明T4噬菌體基因32 編碼蛋白可以促進(jìn)限制性內(nèi)切酶的消化反應(yīng)、RT-PCR 中反轉(zhuǎn)錄的效率、增強(qiáng)T4 DNA聚合酶的活性和提高PCR的產(chǎn)量。

組分

應(yīng)用[1]

T4噬菌體基因32編碼蛋白可用于穩(wěn)定和標(biāo)記ssDNA結(jié)構(gòu)。在某些PCR反應(yīng)條件下,增加PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量。增加RT-PCR過程中,反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力。

在 RT-PCR 過程中,增加反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力;土壤樣品進(jìn)行 PCR 時(shí),增加目的片段的產(chǎn)量和特異性;穩(wěn)定和標(biāo)記 ssDNA 結(jié)構(gòu);

產(chǎn)品特點(diǎn)[1]

1. 高效:以λDNA為模板,擴(kuò)增長度可達(dá)8kb,能高效擴(kuò)增≤4kb片段(圖例一)。

2 .靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段(圖例二)。

3. 高品質(zhì):完全滿足Real Time PCR實(shí)驗(yàn)要求。

4. 獨(dú)特配方的5×Buffer:使PCR擴(kuò)增反應(yīng)更加穩(wěn)定、靈敏、高效。

儲(chǔ)存

-20℃可保存3年。

使用注意事項(xiàng)

(1)該蛋白分子量為33kD。

(2)該蛋白保存液含50%甘油。

(3)該蛋白的反應(yīng)溫度為37℃,65℃ 20min可使該蛋白失活。

質(zhì)量保證

經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶;

PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,無核酸內(nèi)、外切酶污染。

每批產(chǎn)品均通過檢測與單鏈引物結(jié)合后其涌動(dòng)率的改變來檢測其活性。

使用建議

反應(yīng)體系,1X Reaction Buffer,37°C溫育

主要參考文獻(xiàn)

[1] 邢玉華, 譚俊杰, 李玉霞, 等. 合成生物學(xué)的關(guān)鍵技術(shù)及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 中國醫(yī)藥生物技術(shù), 2012, 7(5): 357-363.

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