二苯胺是一種帶有花香的固體結(jié)晶有機(jī)化合物。它可以是灰白色，棕褐色或棕色/琥珀色。材料的顏色取決于暴露在空氣和光線中的數(shù)量和時(shí)間。不溶于水。二苯胺主要用于合成橡膠抗氧化劑，染料，醫(yī)藥中間體，潤滑油抗氧化劑和火藥穩(wěn)定劑。本文將介紹其在DNA鑒定中的應(yīng)用。

二苯胺試劑的配制方法

1、稱取1.5g二苯胺，溶于100mL冰乙酸中。

2、在溶液中加入1.5mL濃硫酸，用棕色瓶保存。

3、臨用前，在10mL的上述溶液中再加入0.1mL體積分?jǐn)?shù)為0.2%的乙醛溶液。

4、二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，以保證實(shí)驗(yàn)效果。

DNA的鑒定原理及冷卻原因

DNA中嘌呤核苷酸上的脫氧核糖遇酸生成ω-羥基-γ-酮基戊醛，后者再和二苯胺試劑作用呈現(xiàn)藍(lán)色。二苯胺與DNA的顏色反應(yīng)實(shí)質(zhì)是：酸性條件（H離子）催化嘌呤脫氧核苷酸中糖苷鍵的斷裂先形成游離的脫氧核糖，進(jìn)而形成ω-羥基-γ-酮基戊醛，ω-羥基-γ-酮基戊醛與二苯胺發(fā)生顏色反應(yīng)。水浴加熱促進(jìn)了糖苷鍵的斷裂，因而更有利于增強(qiáng)二苯胺試劑對DNA檢測的敏感性。

加入二苯胺試劑后沸水浴處理的時(shí)間要在5min以上，且要等到冷卻后再觀察結(jié)果，這樣才可以觀察到較為明顯的顯色反應(yīng)。

關(guān)于DNA含量粗略測定

鑒定時(shí)溶液藍(lán)色的深淺，與溶液中DNA含量的多少有關(guān)，可以加入適量乙醛，以提高反應(yīng)的靈敏度。

DNA與二苯胺試劑反應(yīng)后的溶液對波長為595m的光有最大吸收峰，并且DNA的含量在一定范圍時(shí)，吸光度的值與DNA的含量成正比，利用這個(gè)原理可以測定DNA的含量。