背景及概述^[1]

核酸酶是一類催化核苷酸和核酸中的磷酸二酯鍵水解的酶，分內(nèi)切核酸酶(endonucleases)和外切核酸酶(ex-onucleases)，對紫外線引起的DNA大型光損傷和各種化學(xué)物與DNA形成的加合物的切除修復(fù)中起作用。在N-糖基化酶切除異常的堿基形成AP位點(diǎn)(見切除修復(fù))后，如插入酶將正確的堿基插入AP位點(diǎn)仍不能達(dá)到完全修復(fù)時(shí)，即由AP內(nèi)切核酸酶在AP位點(diǎn)或其旁邊的5′端將DNA切開一個(gè)缺口，使一端成為5′-磷酸基，另一端成為3′-OH基。隨之外切核酸酶再切除一些堿基。除AP內(nèi)切核酸酶外，還有一些對某些DNA損傷有特異性的內(nèi)切核酸酶。其中較特殊的是切除由紫外線產(chǎn)生的嘧啶二聚體的UV內(nèi)切核酸酶。它有時(shí)還能作用于許多較大的螺旋扭曲變形損傷。由于UV內(nèi)切核酸酶還具有外切作用，有時(shí)稱之為“切除核酸酶”(ex-cinuclease)。參見切除修復(fù)、聚合和連接酶。

TteAP熱穩(wěn)定核酸酶來源于嗜熱溫泉tengcongensis，該酶識別缺嘌呤/缺嘧啶位點(diǎn)（Apurinic/apyrimidinic）核苷酸，其內(nèi)切酶活性將受損DNA損傷位點(diǎn)進(jìn)行切斷，然后在其外切酶（3’-5’）活性下去除受損DNA位點(diǎn)，完成DNA的損傷修復(fù)。TteAP熱穩(wěn)定核酸酶酶極其耐熱，反應(yīng)溫度為70℃。

使用注意事項(xiàng)^[1]

（1）1×TteAPBuffer：20mMTris，10mMMgCl2，1mMDTT（pH7.9@25℃）。

（2）該酶的反應(yīng)溫度為70°C，90°C5min失活。

（3）該酶與PCR反應(yīng)條件兼容。

主要參考資料

[1] 衛(wèi)生學(xué)大辭典