背景及概述^[1-2]

人膀胱平滑肌細胞分離自膀胱組織；膀胱是貯尿的囊狀器官?？仗摃r呈錐體形，分為底、體及頸部。伸縮性大，其形狀、位置、大小、壁的厚度等隨尿的充盈度而異。容量隨年齡、性別和個體亦不同，平均為350～500毫升。膀胱排空時位于盆腔內(nèi)。膀胱底有左右輸尿管入口；頸部有出口通尿道。排尿時膀胱肌收縮，尿道括約肌開放。人膀胱平滑肌細胞表型的調(diào)控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關，包括膀胱功能障礙。

細胞培養(yǎng)^[2]

人膀胱平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。體外培養(yǎng)膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。人膀胱平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

生理功能^[2]

研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖，膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。人膀胱平滑肌細胞外基質(zhì)的分泌表型可通過細胞所經(jīng)歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑，因此，了解在疾病發(fā)生及持續(xù)過程中平滑肌怎樣變化，這是治療方法取得進展的重要一步。

相關研究^[3]

有實驗研究靜水壓作用下人膀胱平滑肌細胞(hb-SMCs)內(nèi)游離鈣離子濃度([Ca2+]i)的變化及香草型瞬時受體電位(TRPV)基因的表達情況，初步探討機械應力在介導hb-SMCs增殖中的分子機制。方法取第6～7代細胞進行實驗，采用新型Ca2+熒光染色劑Fluo-3/AM負載hb-SMCs，應用倒置激光掃描共聚焦顯微鏡分別測定靜水壓加壓0cmH2O(1cmH2O=0.098kPa)(A組)、200cmH2O作用30min(B組)及撤銷200cmH2O靜水壓(C組)后hb-SMCs內(nèi)[Ca2+]i。

采用RT-PCR技術測定200cmH2O靜水壓作用0、2、6、12、24h時TRPV1、TRPV2及TRPV4基因mRNA的表達量。結果A、B、C組hb-SMCs內(nèi)[Ca2+]i分別為(100.808±1.724)、(122.008±1.575)、(99.918±0.887)U，B組[Ca2+]i明顯高于A、C組(P<0.001)，C組撤銷200cmH2O靜水壓力后[Ca2+]i下降至A組基線水平(t=0.919，P=0.394)。RT-PCR檢測示，200cmH2O靜水壓加壓0h組、2h組、6h組、12h組及24h組TRPV1、TRPV2及TRPV4在hb-SMCs中均有表達，隨時間推移表達無明顯變化；各組間TRPV1、TRPV2、TRPV4mRNA表達量比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結論高水平靜水壓作用下hb-SMCs內(nèi)[Ca2+]i明顯升高。作為可能表達為機械敏感性陽離子通道的TRPV1、TRPV2及TRPV4基因在hb-SMCs中均有表達，機械應力可能通過調(diào)節(jié)其開放量而非上調(diào)其表達量使hb-SMCs內(nèi)[Ca2+]i升高。

主要參考資料

[1] 新編實用醫(yī)學詞典

[2] 運動解剖學、運動醫(yī)學大辭典

[3] 靜水壓對人膀胱平滑肌細胞內(nèi)鈣離子濃度及香草型瞬時受體電位表達的影響