小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒,可特異性地檢測(cè)樣本中小鼠的卵泡刺激素,F(xiàn)SH(促卵泡激素)是一種由垂體分泌的糖蛋白激素,對(duì)性腺發(fā)育和生殖功能至關(guān)重要。小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒的檢測(cè)范圍為4 mIU/ml-140 mIU/ml,適用于生殖生物學(xué)研究中激素動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)、卵巢/睪丸功能評(píng)估、生殖相關(guān)疾病模型構(gòu)建及生殖系統(tǒng)藥物或環(huán)境因子的作用機(jī)制探索等科研場(chǎng)景。

圖1 使用小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒分析的示意圖
檢測(cè)原理
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,用抗小鼠FSH抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí) 驗(yàn)時(shí)樣品(或標(biāo)準(zhǔn)品)中的小鼠FSH會(huì)與包被抗體結(jié)合。后依次加入生物素 化的抗小鼠FSH抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,F(xiàn)SH濃度與OD450值之間呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中FSH的濃度。[1]
性能
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒的靈敏度:最小的FSH檢測(cè)濃度小于1ng/ml。特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠FSH不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。
樣品處理方式
使用小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒的測(cè)試樣品處理方式為:1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2)血漿:使用小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。3)尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。4)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/mL左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
參考文獻(xiàn)
[1] Kreisman M J, McCosh R B, Breen K M. A modified ultra-sensitive ELISA for measurement of LH in mice[J]. Endocrinology, 2022, 163:109.