技術(shù)背景

三尖杉堿，英文名Cephalotaxine，分子式為C18H21NO4，外觀為白色晶體，熔點為132-133℃，三尖杉堿主要存在于三尖杉屬植物中，其中多種酯類衍生物已經(jīng)被臨床證實具有治療多種腫瘤疾病的作用，在臨床上已被廣泛使用。三尖杉堿具有非常特殊的五環(huán)稠環(huán)結(jié)構(gòu)，其絕對立體構(gòu)型為：3S,4S,5R。三尖杉堿部分的構(gòu)象非常類似于外消旋甲硫氨酸的構(gòu)象。

三尖杉堿提取介紹

三尖杉堿也可以通過化學合成的方法獲得，但較為繁瑣，合成有一定難度。除了化學合成方法獲得三尖杉堿外，還可以通過提取的方法來獲得三尖杉堿。南京標科生物科技有限公司在其發(fā)明專利《一種從三尖杉中提取三尖杉堿的方法》通過提取的方法得到了三尖杉堿[1]。其主要處理步驟包括：三尖杉枝葉粉碎，過100目篩；酸性乙醇溶液中，超聲波-微波輔助提??；堿調(diào)pH值至9-11，上三氧化鋁柱純化分離；以氯仿萃取2-3次，減壓濃縮得到三尖杉堿粗品；無水乙醇重結(jié)晶2次，得到三尖杉堿純品。其具體得到三尖杉堿的實施方式為：三尖杉枝葉粉碎，過100目篩，取三尖杉粗粉1kg，加入8倍的70%的乙醇溶液，鹽酸調(diào)節(jié)pH值為3.0，置于超聲-微波提取裝置中，超聲波600W（常開），微波功率400W，提取時間為90分鐘，提取液離心，取上清液，氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至9，直接通過三氧化鋁柱吸附，乙醚洗脫，流速為10mL/min，至流出洗脫液無生物堿反應為止，濃縮洗脫液，用氯仿萃取三次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到三尖杉堿粗品，無水乙醇重結(jié)晶兩次，即可得到白色晶體三尖杉堿1.85g，經(jīng)過檢測，其光學純度為90.1%。

三尖杉堿應用簡介

三尖杉堿由于其特有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，具有廣泛的應用。龔先玲，陳志紅，張華華在其論文《三尖杉堿誘導肝癌細胞自噬的研究》中探討了三尖杉堿抑制肝癌細胞增殖的方式及機制[2]。其研究結(jié)果表明，三尖杉堿以時間和劑量依賴方式抑制肝癌細胞HepG2增殖；吖啶橙染色顯示酸性囊泡細胞器增加；隨著三尖杉堿作用濃度增加，自噬標志性蛋白LC3-II以及Beclin-1表達上調(diào)。自噬抑制劑3-MA可抑制細胞增殖，下調(diào)蛋白LC3-II以及Beclin-1表達，三尖杉堿通過上調(diào)Beclin-1誘導肝癌細胞發(fā)生自噬，從而抑制肝癌細胞增長。

參考文獻

[1] 南京標科生物科技有限公司. 一種從三尖杉中提取三尖杉堿的方法. CN104193755[P]; 2014.12.10.

[2] 龔先玲, 陳志紅, 張華華. 三尖杉堿誘導肝癌細胞自噬的研究[J]. 廣東醫(yī)科大學學報, 2018, 36(4):351-355.