技術(shù)背景

三尖杉?jí)A，英文名Cephalotaxine，分子式為C18H21NO4，外觀為白色晶體，熔點(diǎn)為132-133℃，三尖杉?jí)A主要存在于三尖杉屬植物中，其中多種酯類衍生物已經(jīng)被臨床證實(shí)具有治療多種腫瘤疾病的作用，在臨床上已被廣泛使用。三尖杉?jí)A具有非常特殊的五環(huán)稠環(huán)結(jié)構(gòu)，其絕對(duì)立體構(gòu)型為：3S,4S,5R。三尖杉?jí)A部分的構(gòu)象非常類似于外消旋甲硫氨酸的構(gòu)象。

三尖杉?jí)A提取介紹

三尖杉?jí)A也可以通過(guò)化學(xué)合成的方法獲得，但較為繁瑣，合成有一定難度。除了化學(xué)合成方法獲得三尖杉?jí)A外，還可以通過(guò)提取的方法來(lái)獲得三尖杉?jí)A。南京標(biāo)科生物科技有限公司在其發(fā)明專利《一種從三尖杉中提取三尖杉?jí)A的方法》通過(guò)提取的方法得到了三尖杉?jí)A[1]。其主要處理步驟包括：三尖杉枝葉粉碎，過(guò)100目篩；酸性乙醇溶液中，超聲波-微波輔助提取；堿調(diào)pH值至9-11，上三氧化鋁柱純化分離；以氯仿萃取2-3次，減壓濃縮得到三尖杉?jí)A粗品；無(wú)水乙醇重結(jié)晶2次，得到三尖杉?jí)A純品。其具體得到三尖杉?jí)A的實(shí)施方式為：三尖杉枝葉粉碎，過(guò)100目篩，取三尖杉粗粉1kg，加入8倍的70%的乙醇溶液，鹽酸調(diào)節(jié)pH值為3.0，置于超聲-微波提取裝置中，超聲波600W（常開(kāi)），微波功率400W，提取時(shí)間為90分鐘，提取液離心，取上清液，氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至9，直接通過(guò)三氧化鋁柱吸附，乙醚洗脫，流速為10mL/min，至流出洗脫液無(wú)生物堿反應(yīng)為止，濃縮洗脫液，用氯仿萃取三次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到三尖杉?jí)A粗品，無(wú)水乙醇重結(jié)晶兩次，即可得到白色晶體三尖杉?jí)A1.85g，經(jīng)過(guò)檢測(cè)，其光學(xué)純度為90.1%。

三尖杉?jí)A應(yīng)用簡(jiǎn)介

三尖杉?jí)A由于其特有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，具有廣泛的應(yīng)用。龔先玲，陳志紅，張華華在其論文《三尖杉?jí)A誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞自噬的研究》中探討了三尖杉?jí)A抑制肝癌細(xì)胞增殖的方式及機(jī)制[2]。其研究結(jié)果表明，三尖杉?jí)A以時(shí)間和劑量依賴方式抑制肝癌細(xì)胞HepG2增殖；吖啶橙染色顯示酸性囊泡細(xì)胞器增加；隨著三尖杉?jí)A作用濃度增加，自噬標(biāo)志性蛋白LC3-II以及Beclin-1表達(dá)上調(diào)。自噬抑制劑3-MA可抑制細(xì)胞增殖，下調(diào)蛋白LC3-II以及Beclin-1表達(dá)，三尖杉?jí)A通過(guò)上調(diào)Beclin-1誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞發(fā)生自噬，從而抑制肝癌細(xì)胞增長(zhǎng)。

參考文獻(xiàn)

[1] 南京標(biāo)科生物科技有限公司. 一種從三尖杉中提取三尖杉?jí)A的方法. CN104193755[P]; 2014.12.10.

[2] 龔先玲, 陳志紅, 張華華. 三尖杉?jí)A誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞自噬的研究[J]. 廣東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2018, 36(4):351-355.