冬凌草[Rabdosia rubescens]系唇形科香茶菜屬植物，冬凌草乙素(Ponicidin,PON)是從其中提取出來的一種二萜類化合物。既往作用。既往的體外研究資料表明，冬凌草乙素具有體外抗腫瘤作用，其抗腫瘤作用機制可能與抗突變作用、降低腫瘤細胞的鈉泵轉(zhuǎn)運活性從而延緩腫瘤細胞的生長速度、逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的耐藥性、增強抗腫瘤藥物的療效等有關(guān)間。新近資料表明，冬凌草乙素可通過誘導膽管癌細胞凋亡而發(fā)揮抗腫瘤凌草乙索可以通過調(diào)節(jié)某些凋亡相關(guān)基因的變化而誘導實體瘤如肺癌，以及人白血病細胞系U937、THP-1等腫瘤細胞的凋亡，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。

活性研究

1、為觀察冬凌草乙素對白血病HL-60細胞的體外增殖抑制作用及其機制。劉曉丹等人以不同濃度的冬凌草乙素(10-50μmol/L)作用于體外培養(yǎng)的HL-60細胞24,48,72h,應用MTT法檢測細胞生長抑制率,流式細胞術(shù)檢測細胞周期,免疫印跡法檢測Caspase-3及其裂解底物多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)表達水平的變化,并對細胞周期調(diào)節(jié)蛋白P21、P16的表達水平進行檢測。結(jié)果與結(jié)論:冬凌草乙素可顯著抑制細胞的生長及誘導細胞發(fā)生凋亡,呈現(xiàn)出明顯的量-效與時-效關(guān)系，流式細胞術(shù)檢測結(jié)果表明細胞主要被阻滯在G0/G1期,50μmol/L的冬凌草乙素作用48h后可以出現(xiàn)典型的亞G1期峰(細胞凋亡峰)。免疫印跡法檢測結(jié)果顯示Mr32000的Caspse-3酶被活化出現(xiàn)Mr20000亞單位片段,同時Caspse-3的底物PARP被裂解出現(xiàn)Mr89000的亞單位片段,免疫印跡法檢測結(jié)果還顯示50μmol/L的冬凌草乙素作用不同時間后,細胞周期調(diào)節(jié)蛋白P21及P16的表達水平逐漸升高。結(jié)果提示冬凌草乙素在體外對HL-60細胞具有顯著的細胞周期阻滯作用,并誘導細胞發(fā)生凋亡,通過上調(diào)細胞周期調(diào)節(jié)蛋白P21及P16的表達水平及激活Caspse-3可能是冬凌草乙素引起HL-60細胞G0/G1阻滯及誘導細胞發(fā)生凋亡的重要作用機制之一[1]。

2、為探討冬凌草乙素對U937細胞的生長抑制作用及其作用機制。劉加軍等人以不同濃度的冬凌草乙素作用于體外培養(yǎng)的U937細胞,MTF法檢測細胞生長抑制率,應用hoechst 33258熒光染色法觀察細胞凋亡;采用RT-PCR對細胞凋亡前后β-catenin的表達水平進行檢測。結(jié)果:冬凌草乙素可顯著抑制細胞的生長及誘導細胞發(fā)生凋亡,呈現(xiàn)出明顯的量-效與時-效關(guān)系，在冬凌草乙素抑制細胞增殖過程中β-catenin的表達水平顯著下降。結(jié)論:冬凌草乙素能抑制U937細胞的生長并誘導細胞發(fā)生凋亡,降低β-catenin的表達水平可能是其重要作用機制之一，這為冬凌草乙素抗白血病的進一步研究提供了有力的實驗依據(jù)[2]。

參考文獻

[1]劉曉丹,劉文達,王春芝,等. 冬凌草乙素對白血病HL-60細胞的增殖抑制作用[J]. 中國組織工程研究與臨床康復,2010,14(27):5062-5066. DOI:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.27.028. 

[2]劉加軍,劉文達,劉曉丹,等. 冬凌草乙素對U937細胞的生長抑制作用及β-catenin表達水平的影響[J]. 實用醫(yī)學雜志,2010,26(17):3077-3079. DOI:10.3969/j.issn.1006-5725.2010.17.001.