嘌呤霉素二鹽酸鹽是氨基核苷類抗生素，廣譜蛋白質(zhì)合成抑制劑，細胞篩選與蛋白合成檢測的金標準試劑。嘌呤霉素二鹽酸鹽為白色至類白色結晶性粉末，熔點：168–170°C，易溶于水，可溶于甲醇、DMSO；水溶液穩(wěn)定，常溫穩(wěn)定，建議-20°C避光密封保存。
用途
吳林霖在KDM4B對吉西他濱藥物敏感性影響的實驗研究中，采用PANC-1細胞敲除KDM4B基因后予以培養(yǎng)并使用嘌呤霉素二鹽酸鹽進行篩選獲得穩(wěn)轉株。用最終濃度為100nM的吉西他濱處理穩(wěn)轉株，同時設置正常培養(yǎng)的穩(wěn)轉株作為對照組，藥物處理3天后，MTT法檢測各組細胞的增殖活性。結果:KDM4B shRNA穩(wěn)轉PANC-1細胞株經(jīng)Western blot驗證表明，KDM4B表達在PANC-1細胞中被穩(wěn)定抑制。在100nM吉西他濱處理KDM4B shRNA穩(wěn)轉PANC-1細胞株前后，MTT測得細胞活性并計算SI，得出SI=-0.04，對吉西他濱的協(xié)同性無統(tǒng)計學意義[1]。
取8.1mg 2-(丙-2-炔-1-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)-3H-二氮雜環(huán)丙烯-3-基)苯甲酸（28.5pmol）溶于300μL DMF中，加入64.3mg EDC（335pmol）與31.3mg NHS（285pmol），孵育3分鐘，所得溶液記為溶液A。2-(丙-2-炔-1-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)-3H-二氮雜環(huán)丙烯-3-基) 苯甲酸的羧基經(jīng)EDC/NHS活化后，易被嘌呤霉素的伯胺發(fā)生親核進攻。將11.4mg嘌呤霉素二鹽酸鹽（21pmol）溶于300μL pH7.4 PBS中，攪拌下加入溶液A，得到溶液B。隨后加入1.5mL甲醇（MeOH），將溶液B攪拌過夜。真空蒸除甲醇，得到DMSO?水溶液，記為溶液C。最終產(chǎn)物（3PN）采用碳酸鈉緩沖液沉淀法純化：向溶液C中加入1mL pH9.0 Na?CO?緩沖液，析出白色沉淀；該過程重復5次。最終沉淀經(jīng)干燥后，重新分散于200μL DMSO中?？傎|(zhì)量：6.05mg，收率：39%[2]。
將嘌呤霉素二鹽酸鹽（150mg，276μmol）懸浮于二氯甲烷（25mL）中，在0℃下攪拌。向該懸浮液逐滴加入三乙胺（300μL，2.76mmol），繼續(xù)攪拌至溶液澄清。向溶液中緩慢加入二碳酸二叔丁酯（301mg，1.38mmol），并在室溫下攪拌4小時。用旋轉蒸發(fā)儀除去溶劑，殘余物經(jīng)正相柱層析（二氯甲烷/甲醇）純化，得到化合物4（155mg，271μmol，定量收率）[3]。
參考文獻
[1] 吳林霖. 胰腺癌中ASH2L和KDM4B基因的功能分析及臨床意義[D]. 上海:復旦大學,2013. DOI:10.7666/d.Y2700448.
[2] IMMAGINA BIOTECHNOLOGY S.R.L.. NOVEL MOLECULES FOR TARGETING RIBOSOMES AND RIBOSOME-INTERACTING PROTEINS, AND USES THEREOF:WO2019055802W[P]. 2020-01-16.
[3] Ohno, H.; Sumitani, S. Fluorescent probe for detecting protein synthesis in mitochondria. JP 2025?130748 A, 2025?09?09.