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HT22細胞(小鼠海馬神經(jīng)元細胞) (STR鑒定正確)的培養(yǎng)方法

2026/5/30 8:00:48 作者:火華

簡介

HT22細胞(小鼠海馬神經(jīng)元細胞) (STR鑒定正確)(HT22細胞)是小鼠海馬神經(jīng)元細胞系,其生長形態(tài)、生理特性、激活方式等與原代海馬神經(jīng)元細胞有相似性,常用于神經(jīng)退行性疾病的研究。海馬體作為大腦中負責學習與記憶的核心區(qū)域,其神經(jīng)元損傷是糖尿病腦病的重要病理基礎。研究表明,高糖或晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)可誘導HT22細胞氧化應激、炎癥反應及凋亡,模擬糖尿病腦病中海馬神經(jīng)元退行性變的病理過程。因此研究人員通過高糖刺激HT22細胞建立高糖損傷的DE模型[1]。

 HT22細胞(小鼠海馬神經(jīng)元細胞) (STR鑒定正確)的性狀

HT22細胞(小鼠海馬神經(jīng)元細胞) (STR鑒定正確)的性狀

培養(yǎng)方法

(1)HT22完全培養(yǎng)基配制方案:基礎培養(yǎng)基選用高糖DMEM占比89%,補充10%胎牛血清FBS及1%青霉素-鏈霉素雙抗溶液。(2)HT22細胞復蘇流程:快速解凍,將液氮保存的細胞凍存管迅速轉(zhuǎn)移至37℃恒溫水浴裝置,持續(xù)輕柔振蕩直至冰塊融化,時長大約1min-2min;離心純化,將解凍細胞懸液轉(zhuǎn)移至含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中,以1000rpm處理5分鐘,棄除上清;重懸接種,加入新鮮完全培養(yǎng)基輕柔重懸細胞沉淀,均勻接種于T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,置于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(3)HT22細胞傳代:當細胞融合率達到80%-90%時,按以下步驟執(zhí)行傳代:清除原培養(yǎng)液,用磷酸鹽緩沖PBS洗滌2次,加入0.25%胰蛋白酶溶液酶解消化1-2min,立即加入2-3倍含F(xiàn)BS的完全培養(yǎng)基終止胰酶消化。室溫下1000rpm/min處理5min,棄除上清后加入5mL新鮮完培輕柔吹打分散,將細胞懸液以1:3的比例分配至新培養(yǎng)容器,繼續(xù)標準條件培養(yǎng)。(4)HT22細胞凍存:HT22細胞凍存液的配置比例為:10%DMSO+10%胎牛血清+80%完培。重復上述消化步驟,取對數(shù)生長期的HT22細胞,消化后離心收集細胞,用含10%DMSO的凍存液重懸細胞,分裝至凍存管中,置于程序降溫盒中,-80℃過夜后(24h內(nèi))轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期保存[1]。

參考文獻

[1] 曾川匯. 桑葉DNJ提取物對高糖誘導HT22細胞損傷保護的機制研究[D]. 成都醫(yī)學院, 2025. DOI:10.27843/d.cnki.gcdyy.2025.000261.

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