嘌呤霉素（Puromycin,PM）是白黑鏈霉菌發(fā)酵產生的氨基糖苷類抗生素，為廣譜蛋白質合成抑制劑，對原核與真核細胞均有作用。

應用研究

丁方睿等人探討地黃葉總苷膠囊有效成分毛蕊花糖苷在治療蛋白尿和保護足細胞中的作用機制。本研究通過建立嘌呤霉素大鼠腎病模型,檢測尿蛋白、足細胞損傷標志物和電鏡下觀察足突融合狀態(tài)探討毛蕊花糖苷對蛋白尿治療和對足細胞保護的作用;通過體外建立嘌呤霉素誘導足細胞損傷模型,進行足細胞活力實驗、遷移實驗、足細胞細胞骨架檢測,以及足細胞損傷標志物nephrin檢測,探討毛蕊花糖苷對足細胞保護效應。結果，體內研究中,毛蕊花糖苷可以有效地降低嘌呤霉素大鼠蛋白尿水平(P＜0.05),恢復足細胞損傷標志物nephrin、synaptopodin的蛋白表達(均P＜0.05),緩解足細胞足突融合;體外研究中,毛蕊花糖苷可以有效恢復足細胞活力(P＜0.05),降低足細胞受損后增強的遷移能力(P＜0.05),保護足細胞細胞骨架,恢復nephrin蛋白表達(P＜0.05)。因此，本研究證實毛蕊花糖苷可以通過保護足細胞降低嘌呤霉素誘導腎病大鼠蛋白尿及緩解嘌呤霉素誘導足細胞損傷,豐富了對地黃葉總苷膠囊降低蛋白尿作用的認識[1]。

為獲取純度較高的人真皮微血管內皮細胞(HDMEC)。侯慧等人取手術切除的多余包皮剪碎,通過兩次酶消化接種于35mm 6孔板中,加入含0.5μg/mL嘌呤霉素的內皮細胞培養(yǎng)基,3d后更換新鮮培養(yǎng)基;采用倒置單光子共聚焦顯微鏡觀察內皮細胞形態(tài);流式細胞術檢測HDMEC細胞表面標志CD31的表達情況。結果，培養(yǎng)72h后可見內皮細胞長出,細胞呈圓形,生長至第5天左右,以梭形細胞為主,第6～10天迅速增殖,形成比較緊密的融合細胞,細胞集落中心為圓形細胞,周圍為梭形,呈放射狀,第10天可達80％融合,細胞呈典型鋪路石樣,可見“漩渦狀”特征。流式細胞術檢測顯示HDMEC的CD31表達陽性,CD44表達陰性,內皮細胞純度達98％以上。因此，該方法能夠成功獲得高純度的人真皮微血管內皮細胞HDMEC,對皮膚疾病致病機制以及HDMEC的生物學特性和功能的深入研究具有重要意義[2]。

參考文獻

[1]丁方睿,司南,邊寶林,等. 毛蕊花糖苷對嘌呤霉素腎病及足細胞損傷模型的療效研究[J]. 中華腎臟病雜志,2018,34(1):30-35. DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2018.01.006.

[2]侯慧,李嬌,梁見楠,等. 嘌呤霉素介導的人真皮微血管內皮細胞的分離純化培養(yǎng)與鑒定[J]. 中國皮膚性病學雜志,2019,33(11):1255-1259. DOI:10.13735/j.cjdv.1001-7089.201903088.