SK-HEP-1是一種歷史悠久但分類特殊的人源細胞系。1971年，該細胞系建立自一名52歲白人男性癌癥患者的肝臟腹水,細胞形態(tài)為典型的上皮細胞樣，以貼壁生長的方式進行增殖，其染色體核型分析為亞三倍體（Hypotriploid），染色體計數(shù)范圍較寬，性別鑒定為女性（XX），具有強大的致瘤能力，在免疫缺陷小鼠（如裸鼠）體內能高效形成腫瘤。

主要應用領域

SK-HEP-1細胞系在多個生物醫(yī)學領域有廣泛應用：在腫瘤學與血管生成研究中，作為研究肝癌、尤其是腫瘤血管生成的經(jīng)典體外模型。其形成的血管樣結構使其成為篩選抗血管生成藥物的理想平臺。在藥物篩選與毒理學中，廣泛用于抗腫瘤藥物的體外篩選和評估，以及化合物的肝毒性測試。在癌癥轉移機制研究中，常用于構建裸鼠皮下移植瘤模型，以研究腫瘤的生長、侵襲、轉移機制以及相關基因的功能。

肝癌是全球范圍內發(fā)病率與死亡率均居高不下的惡性腫瘤，嚴重威脅人類健康。在肝癌基礎研究和藥物開發(fā)過程中，合適的細胞模型至關重要。研究表明，SK-HEP-1 人肝癌細胞對達沙替尼（dasatinib）和 Ponatinib 均表現(xiàn)出高度敏感性，其作用機制與上調 E-鈣黏蛋白（E-cadherin）表達密切相關。此外，通過電穿孔技術成功構建了穩(wěn)定高表達人 GPC3 的 SK-HEP-1 人肝癌細胞系，為肝癌靶向治療研究提供了重要的細胞模型。這些發(fā)現(xiàn)進一步確立了 SK-HEP-1 人肝癌細胞作為肝癌基礎與臨床研究重要工具的地位。

達沙替尼對 SK-HEP-1 人肝癌細胞的抑制作用

研究系統(tǒng)評價了多靶點激酶抑制劑達沙替尼對 SK-HEP-1 人肝癌細胞的影響。研究者首先比較了達沙替尼對五種肝癌細胞系（SK-HEP-1、Bel-7402、SNU-423、SNU-387、Huh-7）的增殖抑制作用，結果發(fā)現(xiàn) SK-HEP-1 人肝癌細胞對達沙替尼最為敏感。這一結果表明，SK-HEP-1 人肝癌細胞是研究達沙替尼抗肝癌作用的理想模型^[1]。

進一步的功能實驗顯示，達沙替尼處理可顯著促進 SK-HEP-1 人肝癌細胞的聚集和黏附。細胞緩慢聚集實驗證實，隨著達沙替尼濃度的升高，癌細胞形成的分散團塊數(shù)從對照組的（157.7 ± 9.6）個分別降至（118.0 ± 9.8）個、（31.3 ± 10.0）個和（2.7 ± 1.5）個。細胞分離實驗也證實，達沙替尼處理組 SK-HEP-1 人肝癌細胞的 NTC/NTE 比值顯著降低，表明細胞間黏附力增強^[1]。

劃痕實驗結果表明，達沙替尼能夠顯著抑制 SK-HEP-1 人肝癌細胞的遷移能力。Western blot 分析進一步揭示，達沙替尼處理可濃度依賴性地上調 SK-HEP-1 人肝癌細胞中 E-cadherin 的表達水平。研究者推測，達沙替尼可能通過抑制 Src 激酶活性，減少 E-cadherin 的溶酶體降解，從而促進該細胞的聚集和黏附，抑制其增殖、分散和遷移^[1]。

 Ponatinib 對 SK-HEP-1 人肝癌細胞的抑制作用

在同一研究團隊的后續(xù)工作中，比較了包括 Ponatinib 在內的 24 種酪氨酸激酶抑制劑對 SK-HEP-1 人肝癌細胞的作用。令人矚目的是，在這 24 種抑制劑中，Ponatinib 對該癌細胞的抑制作用最強，顯著優(yōu)于其他抑制劑。功能實驗同樣證實，Ponatinib 能夠促進 該癌細胞的聚集和黏附，Western blot 分析再次證實，Ponatinib 可濃度依賴性地誘導 SK-HEP-1 人肝癌細胞中 E-cadherin 的表達上調^[2]。

比較兩項研究可以發(fā)現(xiàn)，SK-HEP-1 人肝癌細胞對 Ponatinib 的敏感性高于對達沙替尼的敏感性，提示 Ponatinib 可能是更有效的 癌細胞生長抑制劑。兩種藥物均通過上調 E-cadherin 發(fā)揮作用，表明這一機制在 SK-HEP-1 人肝癌細胞中具有普遍意義。

SK-HEP-1 人肝癌細胞作為基因工程改造的宿主細胞

除了作為藥物敏感性研究的模型外，SK-HEP-1 人肝癌細胞還被廣泛用于基因功能研究和蛋白表達系統(tǒng)的構建。實驗中成功構建了穩(wěn)定高表達人 GPC3 的 SK-HEP-1 人肝癌細胞系。GPC3（Glypican-3）是肝細胞癌的重要標志物，在 72%~81% 的肝癌患者中高表達，但在正常肝組織中幾乎不表達，因此成為肝癌靶向治療和診斷的理想靶點。然而，天然表達 GPC3 的肝癌細胞系（如 HepG2）表達量普遍較低，難以滿足研究需求。為此，研究者選擇 SK-HEP-1 人肝癌細胞作為宿主細胞，這是因為該癌細胞本身幾乎不表達 GPC3 蛋白，適合作為外源 GPC3 表達的背景細胞。通過電穿孔法將 pcDNA3.1-GPC3 真核表達載體轉染至 SK-HEP-1 人肝癌細胞后，經(jīng) G418 篩選（最佳篩選濃度為 700 μg/mL），成功獲得了穩(wěn)定表達 GPC3 的 SK-HEP-1/GPC3 細胞系。Western blot 和流式細胞術鑒定結果顯示，該細胞系不僅在細胞表面穩(wěn)定表達 GPC3 蛋白，且表達量顯著高于天然表達 GPC3 的 HepG2 細胞，陽性率達到 100%^[3]。

這一 SK-HEP-1 人肝癌細胞來源的穩(wěn)轉細胞系的建立，為后續(xù) GPC3 治療性抗體的篩選、驗證和功能研究提供了理想的細胞模型，也展示了 SK-HEP-1 人肝癌細胞作為基因工程宿主細胞的巨大潛力。

參考文獻

[1] 劉暢, 裴晉紅, 穆秀麗, 等. 達沙替尼(dasatinib)通過上調上皮鈣黏蛋白表達抑制SK-Hep-1人肝癌細胞的增殖、分散和遷移[J]. 細胞與分子免疫學雜志, 2021, 37(9):801-807.

[2] 劉暢, 裴晉紅, 穆秀麗, 等. 多靶點蛋白酪氨酸激酶抑制劑Ponatinib對人肝癌細胞SK-Hep-1增殖、黏附和遷移能力的影響[J]. 中國生物制品學雜志, 2023, 36(6): 668-672,679.

[3] 何琦琳, 郎巧利, 余琳, 等. 穩(wěn)定高表達人GPC3的SK-Hep-1細胞系的構建[J]. 中國比較醫(yī)學雜志, 2020, 30(2): 59-63.