介紹
遠(yuǎn)志皂甙B是遠(yuǎn)志其中有效成分之一，具有促進智力、減少心肌損傷、鎮(zhèn)咳和祛痰的作用，在遠(yuǎn)志中的含量為1 .62％～2 .26％。有研究表明，在PC?12細(xì)胞中，遠(yuǎn)志皂甙B能促進自噬，加速突變α?突觸核蛋白和亨廷頓蛋白的降解，可用于帕金森病和亨廷頓病的研究。遠(yuǎn)志皂甙B可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑，不溶于石油醚和乙酸乙酯；其英文名為Sinegin3，Onjisaponin B；分子式為C75H112O35。
圖一 遠(yuǎn)志皂甙B
制備
目前，遠(yuǎn)志皂甙B主要通過常規(guī)方法分離得到，一般是先醇提取，再通過石油醚、乙酸乙酯和正丁醇分別萃取，再采用乙酸乙酯層或正丁醇層進行硅膠柱層析，得到遠(yuǎn)志皂甙B。常規(guī)方法使用硅膠柱層析，分離時間長、收率低、成本高，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。
1)脫脂：將遠(yuǎn)志原料粉碎，采用遠(yuǎn)志原料質(zhì)量10?15倍量的第一有機溶劑對遠(yuǎn)志原料進行回流提取多次，回流提取的溫度為50℃?60℃，每次回流提取時間為2h，第一有機溶劑為石油醚或乙酸乙酯；過濾收集濾液，將濾液濃縮得到提取渣，回收第一有機溶劑。取遠(yuǎn)志原料10kg(遠(yuǎn)志皂甙B含量1 .82％)粉碎至60目，用遠(yuǎn)志原料質(zhì)量10倍量的石油醚在60℃下回流提取3次，每次2h，過濾收集濾液，將濾液濃縮得到提取渣， 并回收石油醚。
2)醇提?。翰捎脻舛葹?5％?95％的乙醇，乙醇的用量為遠(yuǎn)志原料質(zhì)量的10?15倍， 在60℃?70℃下對提取渣進行多次提取，每次提取時間為2h；過濾收集濾液，將濾液濃縮至乙醇濃度為30％?50％，得到第一濃縮液。將提取渣采用遠(yuǎn)志原料量15倍量、濃度為85％的乙醇，在65℃下提取 3次，每次2h，過濾收集濾液，將濾液濃縮至乙醇濃度為30％，得到第一濃縮液。
3)吸附：采用大孔樹脂對第一濃縮液進行吸附，收集吸附流出液；其中，大孔樹脂的類型為AB?8、D101、D201、D301、DM130和SP825中的任一種；本實施例中采用的是DM130大孔樹脂吸附。
4)濃縮沉降：將吸附流出液進行濃縮，加入絮凝劑，絮凝劑為殼聚糖，加入殼聚糖的體積是吸附流出液濃縮后得到的液體體積的6％?15％；依次進行攪拌、靜置、離心、過濾， 其中，攪拌的溫度為60 ℃ ?65 ℃ ，攪拌時間為30min；靜置為在1 5 ℃ ?25 ℃條件下靜置24h? 48h，收集沉淀并干燥。將吸附流出液濃縮至少量，加入吸附流出液濃縮后得到的液體體積 10％的殼聚糖，在60℃下進行攪拌30min，20℃下放置48h，離心，過濾，收集沉淀，將沉淀干燥。
5)分離純化：采用沉淀質(zhì)量5?10倍量的有機混合溶劑對沉淀進行攪拌提取，有機混合溶劑為二氯甲烷?甲醇混合溶劑或三氯甲烷?甲醇混合溶劑，其中，二氯甲烷與甲醇的體積比值和三氯甲烷與甲醇的體積比值均為9:1；提取液濃縮至無溶劑，再加入濃度為95％ 的乙醇攪拌溶解，濃縮得到第二濃縮液；再加入第二濃縮液質(zhì)量1?2倍量的第二有機溶劑， 第二有機溶劑為丙酮或乙醚，且丙酮的體積濃度為80％?90％，乙醚為純品；攪拌至結(jié)晶析出，靜置8h?12h，過濾，得到遠(yuǎn)志皂甙B粗品。沉淀采用沉淀質(zhì)量10倍量的三氯甲烷?甲醇混合溶劑進行攪拌提取， 其中三氯甲烷?甲醇比例為9:1，攪拌提取2次，每次1 .5h，提取液濃縮至無溶劑，加入濃度為95％的乙醇攪拌溶解，濃縮至少量，再加入濃縮液質(zhì)量1 .5倍量、體積濃度為85％的丙酮，攪拌至結(jié)晶析出，靜置12h，過濾，得到遠(yuǎn)志皂甙B粗品。
6)在遠(yuǎn)志皂甙B粗品中加入遠(yuǎn)志皂甙B粗品質(zhì)量15?30倍量、濃度為60％?80％的乙醇，在60℃?70℃進行溶解，加入遠(yuǎn)志皂甙B粗品質(zhì)量的8％?15％的活性炭進行脫色，過濾收集濾液，將濾液濃縮至質(zhì)量為遠(yuǎn)志皂甙B粗品質(zhì)量的1?3倍量，4 ℃ ?8 ℃放置24h?36h析出晶體，過濾得到結(jié)晶，用乙醇漂洗結(jié)晶，干燥后得到精制的遠(yuǎn)志皂甙B。遠(yuǎn)志皂甙B粗品采用遠(yuǎn)志皂甙B粗品質(zhì)量15倍量、濃度為80％的乙醇， 在65℃下溶解后，加入遠(yuǎn)志皂甙B粗品質(zhì)量8％的活性炭，在65℃下進行脫色1h，過濾，濾液濃縮至粗品量的1 .5倍量，然后在4℃下放置24h，過濾得到結(jié)晶，用少量乙醇漂洗結(jié)晶，干燥，共得到0.154kg產(chǎn)品，遠(yuǎn)志皂甙B含量為98 .61％，提取率1 .54％，有效成分回收率為 83 .44％，HPLC圖譜如圖二所示[1]。
圖二 HPLC圖譜
參考文獻
[1]陜西嘉禾生物科技股份有限公司.一種從遠(yuǎn)志中制備遠(yuǎn)志皂甙B的方法:202310277699.5[P].2024-11-29.