人血管內(nèi)皮生長因子 酶聯(lián)免疫試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，能夠?qū)ρ?、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清及組織勻漿等樣本中的人VEGF進(jìn)行高靈敏度、高特異性的定量檢測。血管內(nèi)皮生長因子是一種具有高度生物學(xué)活性的同型二聚體糖蛋白，其主要功能包括促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與遷移、增加血管通透性以及誘導(dǎo)新生血管形成。在妊娠過程中，VEGF參與黃體形成、滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤、胎盤血管網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建等多個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
檢測原理
人血管內(nèi)皮生長因子 酶聯(lián)免疫試劑盒的核心檢測原理為雙抗體夾心ELISA法。人VEGF特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)先包被于酶標(biāo)板上。當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品時(shí)，樣品中的人VEGF會與捕獲抗體特異性結(jié)合。隨后加入生物素化的抗人VEGF檢測抗體，形成“捕獲抗體—VEGF—檢測抗體”的夾心免疫復(fù)合物。再加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素，利用生物素與鏈霉親和素的高親和力結(jié)合，使酶標(biāo)記物連接到免疫復(fù)合物上。最后加入顯色底物TMB，在辣根過氧化物酶的催化下產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，加入終止液后變?yōu)辄S色。顏色的深淺與樣本中VEGF濃度成正比，通過酶標(biāo)儀在450 nm波長處測定吸光度值，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中VEGF的精確濃度。
反復(fù)自然流產(chǎn)研究中的應(yīng)用
人血管內(nèi)皮生長因子 酶聯(lián)免疫試劑盒在定量檢測血清VEGF中具有關(guān)鍵價(jià)值。通過該試劑盒提供的精確濃度數(shù)據(jù)，研究者能夠客觀比較不同組別間的VEGF差異，為闡明VEGF低表達(dá)與流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。在探討生存素及VEGF與反復(fù)自然流產(chǎn)的關(guān)系研究中，選取60例反復(fù)自然流產(chǎn)患者作為觀察組，同期60例人工流產(chǎn)患者作為對照組。研究采用人血管內(nèi)皮生長因子 酶聯(lián)免疫試劑盒對兩組血清VEGF表達(dá)水平進(jìn)行測定，同時(shí)采用免疫組化法檢測絨毛組織VEGF陽性率[1]。
結(jié)果顯示，觀察組血清VEGF表達(dá)水平顯著低于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在絨毛組織中，觀察組VEGF陽性率遠(yuǎn)低于對照組的。該研究明確指出，反復(fù)自然流產(chǎn)患者無論是血清還是絨毛組織中的VEGF表達(dá)均低于健康人，VEGF可能在反復(fù)自然流產(chǎn)的發(fā)生及發(fā)展中具有重要作用[1]。
在藥物流產(chǎn)效果研究中的應(yīng)用
藥物流產(chǎn)是采用米非司酮聯(lián)合米索前列醇終止早期妊娠的常用方法，但部分患者可發(fā)生不全流產(chǎn)。VEGF及其受體在絨毛和蛻膜組織中的表達(dá)水平被認(rèn)為與藥物流產(chǎn)效果有關(guān)。選取92例完全流產(chǎn)婦女和92例不全流產(chǎn)婦女，采用人血管內(nèi)皮生長因子 酶聯(lián)免疫試劑盒檢測兩組藥流前后血清VEGF水平。結(jié)果顯示，藥流前兩組血清VEGF水平無顯著差異。藥流后，兩組血清VEGF均顯著低于藥流前，且完全流產(chǎn)組藥流后血清VEGF水平顯著低于不全流產(chǎn)組。此外，完全流產(chǎn)組絨毛組織中VEGF陽性率，蛻膜組織中VEGF陽性率均顯著低于不全流產(chǎn)組。該研究認(rèn)為VEGF及其受體參與了藥物流產(chǎn)過程，并與藥物流產(chǎn)效果有關(guān)[2]。
借助人血管內(nèi)皮生長因子 酶聯(lián)免疫試劑盒，比較了90例完全流產(chǎn)者和90例不全流產(chǎn)者的血清VEGF水平。服藥前兩組血清VEGF無顯著差異，服藥后，不全流產(chǎn)組血清VEGF水平顯著高于完全流產(chǎn)組。同時(shí)，不全流產(chǎn)組絨毛和蛻膜組織中VEGF陽性率及OD值均高于完全流產(chǎn)組。該研究推斷，VEGF參與藥物流產(chǎn)過程，藥物流產(chǎn)后VEGF顯著下降有利于妊娠組織完全排出，而不全流產(chǎn)可能與殘留組織中VEGF水平較高、為殘留組織提供營養(yǎng)有關(guān)[3]。
上述研究均采用人血管內(nèi)皮生長因子 酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行血清VEGF定量檢測，所得結(jié)果高度一致，證實(shí)了該試劑盒在藥物流產(chǎn)效果評估中的實(shí)用性和可靠性。
參考文獻(xiàn)
[1] 黃鑄,張慧芬. 生存素及血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)與反復(fù)自然流產(chǎn)的關(guān)系探討[J]. 中國實(shí)用醫(yī)藥,2024,19(1):53-55.
[2] 吳萍,王琳寧,常淑華. 血管內(nèi)皮生長因子與其受體對女性藥物流產(chǎn)效果的影響[J]. 中國婦幼健康研究,2019,30(5):592-595.
[3] 鄭燕,劉靜喬,劉坤,等. 藥物流產(chǎn)與血管內(nèi)皮生長因子及其受體的關(guān)系[J]. 東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2018,37(4):633-637.