銀屑病是一種由遺傳與環(huán)境因素共同誘發(fā)、免疫系統(tǒng)介導(dǎo)的慢性復(fù)發(fā)性炎癥性疾病，典型病理特征為表皮角質(zhì)形成細(xì)胞過(guò)度增殖與分化障礙。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，IL-17和IL-23在銀屑病發(fā)病中起關(guān)鍵作用，特別是通過(guò)調(diào)控Th17細(xì)胞分化，形成IL-23/Th17軸[1]。小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒是用于定量檢測(cè)小鼠樣本中IL-23濃度的專用工具，已成為銀屑病免疫機(jī)制研究和藥效評(píng)價(jià)中重要的實(shí)驗(yàn)手段。
技術(shù)原理
IL-23是由IL-12p40和IL-23p19兩個(gè)亞基組成的異二聚體細(xì)胞因子，主要由活化的巨噬細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生，其功能是促進(jìn)Th17細(xì)胞增殖和活化。小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒普遍采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行定量檢測(cè)。其原理為，將特異性抗小鼠IL-23抗體預(yù)包被于酶標(biāo)板，加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本及生物素化檢測(cè)抗體，形成“捕獲抗體-目標(biāo)蛋白-檢測(cè)抗體”復(fù)合物，再加入酶標(biāo)記物和顯色底物，最終在450 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算IL-23濃度。
應(yīng)用實(shí)例
電針治療銀屑病的機(jī)制研究
采用小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒檢測(cè)電針對(duì)銀屑病小鼠血清IL-23水平的影響。該研究將24只BALB/c小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、電針組和西藥組，每組6只，通過(guò)咪喹莫特誘導(dǎo)銀屑病模型。ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，模型組小鼠血清IL-23水平顯著高于空白組，而電針組和西藥組IL-23水平均顯著低于模型組，且兩組間無(wú)顯著差異[1]。同時(shí)，PASI評(píng)分和HE染色病理結(jié)果也顯示電針能明顯改善皮損。該研究表明，小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒能夠有效檢測(cè)血清中IL-23的濃度變化，為電針通過(guò)下調(diào)IL-23水平發(fā)揮抗炎作用提供了關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持[1]。
何首烏提取物對(duì)銀屑病的干預(yù)研究
利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)IL-23 mRNA表達(dá)，并結(jié)合小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒探討了何首烏提取物（PME）對(duì)銀屑病小鼠的作用。研究將75只BALB/c小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組和PME低、中、高劑量組，連續(xù)給藥7天。RT-qPCR結(jié)果顯示，模型組小鼠皮膚組織中IL-23 mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著升高，而PME各劑量組可呈劑量依賴性降低IL-23 mRNA表達(dá)[2]。該研究未直接用小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒檢測(cè)蛋白，但其mRNA數(shù)據(jù)與ELISA檢測(cè)結(jié)果具有一致性，共同表明PME可通過(guò)抑制IL-23/IL-17炎性軸改善銀屑病皮損[2]。
黃芪對(duì)銀屑病的干預(yù)研究
采用小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒，觀察了黃芪對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)銀屑病小鼠模型的影響。研究將造模成功的小鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、維生素D組、甲氨蝶呤組和黃芪低、中、高劑量組，另設(shè)正常對(duì)照組，持續(xù)干預(yù)3周。ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，模型對(duì)照組血清IL-23水平顯著高于正常對(duì)照組，而黃芪中、高劑量組及維生素D組、甲氨蝶呤組IL-23水平均顯著降低[3]。同時(shí)，該研究還發(fā)現(xiàn)黃芪可上調(diào)皮損維生素D受體表達(dá)，并與IL-23水平下降呈相關(guān)性[3]。該研究充分說(shuō)明，小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒能夠穩(wěn)定、靈敏地檢測(cè)血清IL-23含量，是評(píng)價(jià)藥物干預(yù)銀屑病免疫紊亂效果的核心檢測(cè)工具。
選擇小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒的考量因素
在銀屑病及相關(guān)炎癥性疾病研究中，選擇合適的小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒應(yīng)綜合考慮以下因素。①注意實(shí)驗(yàn)要求的靈敏度與檢測(cè)范圍，低濃度樣本需高靈敏度試劑盒，②注意樣本類型的選擇，血清、血漿、組織勻漿或細(xì)胞上清需匹配，③精密度與特異性的控制，板內(nèi)/板間變異系數(shù)應(yīng)<10%，且與IL-12無(wú)交叉反應(yīng)，④根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)，對(duì)規(guī)格與成本進(jìn)行篩選，根據(jù)樣本量選擇48T、96T或大包裝。
參考文獻(xiàn)
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