TBB培養(yǎng)基，英文全稱為Tyrobutyricum Broth Base，是一種選擇性培養(yǎng)基，其核心用途是用于乳酪產(chǎn)品中梭菌的計數(shù)。在乳品工業(yè)中，Clostridium tyrobutyricum（酪丁酸梭菌）的孢子若存在于原料乳中，會在高pH值奶酪的成熟過程中發(fā)酵乳酸，產(chǎn)生丁酸、乙酸和氫氣，導(dǎo)致奶酪出現(xiàn)“晚產(chǎn)氣”缺陷（blowing defect），嚴重影響產(chǎn)品品質(zhì)。TBB培養(yǎng)基正是為了檢測和計數(shù)這類厭氧梭菌而設(shè)計。
從成分上看，TBB培養(yǎng)基通常包含蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉等營養(yǎng)成分，提供碳氮源、維生素和生長因子。其關(guān)鍵設(shè)計在于通過硫乙醇酸鈉和L-胱氨酸有效降低氧化還原電位，營造梭菌生長所需的厭氧條件，刃天青作為氧化還原指示劑，在有氧狀態(tài)下呈粉紅色，無氧時則變?yōu)闊o色。少量瓊脂的加入則可防止氣體和還原產(chǎn)物的擴散。此外，TBB培養(yǎng)基還可用于培養(yǎng)需氧菌、微需氧菌和厭氧菌，以及藥品生物制品的無菌試驗和食品中產(chǎn)氣莢膜梭菌的厭氧培養(yǎng)。
TBB培養(yǎng)基在痰標本中的實驗應(yīng)用
在細菌學(xué)檢驗的另一個重要領(lǐng)域，痰標本檢驗中，TBB培養(yǎng)基呈現(xiàn)出不同的面貌。在《淺析痰標本在細菌學(xué)檢驗中的應(yīng)用》實驗中，將200例痰標本分別接種于923TBL液體培養(yǎng)基、7H9L半固體培養(yǎng)基、923TBB液體培養(yǎng)基和羅氏固體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。結(jié)果顯示，有1例痰標本在923TBL液體培養(yǎng)基中出現(xiàn)渾濁，有細菌生成，在7H9L半固體培養(yǎng)基中有菌株出現(xiàn)，而在羅氏培養(yǎng)基以及923TBB培養(yǎng)基上則沒有菌株生成[1]。
同樣在《痰培養(yǎng)在細菌學(xué)檢驗中的應(yīng)用》的研究中，150份痰標本中，有1例在923TBL液體培養(yǎng)基中呈現(xiàn)渾濁狀態(tài)并發(fā)現(xiàn)細菌生長，在7H9L半固體蔗糖培養(yǎng)基中存在油煎蛋樣的菌落，而在羅氏培養(yǎng)基、923TBB以及7119B培養(yǎng)基中則未發(fā)現(xiàn)菌落生長[2]。
這兩項研究均表明，923TBB液體培養(yǎng)基在痰標本結(jié)核分枝桿菌L型菌株的分離培養(yǎng)中并未表現(xiàn)出陽性結(jié)果。與之形成對比的是，7H9L半固體培養(yǎng)基成功分離出了呈現(xiàn)典型“油煎蛋”樣菌落的結(jié)核桿菌L型菌株。L型細菌是細菌細胞壁發(fā)生部分缺損或完全喪失而形成的病原菌，在瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)時呈現(xiàn)“油煎蛋”樣式。
培養(yǎng)基的匹配性探討
為什么同為TBB培養(yǎng)基，923TBB液體培養(yǎng)基在痰標本結(jié)核桿菌L型菌株的檢測中未能檢出陽性？答案可能在于TBB培養(yǎng)基的設(shè)計初衷與結(jié)核桿菌L型的生長需求之間存在差異。TBB培養(yǎng)基是為梭菌（Clostridium）的計數(shù)而優(yōu)化設(shè)計的。其成分和厭氧環(huán)境主要針對梭菌屬細菌的特性，梭菌是嚴格的厭氧菌，而結(jié)核分枝桿菌雖然也是專性需氧菌，但其L型變異的生理特性與典型結(jié)核桿菌已有顯著不同。L型細菌因細胞壁肽聚糖含量很少，內(nèi)部滲透壓較低，能夠在低滲環(huán)境中形成具有較好抵抗力的原生質(zhì)球。這種特殊的生理狀態(tài)可能對培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分、滲透壓和生長因子有特殊要求，而專為梭菌設(shè)計的TBB培養(yǎng)基未必能滿足。
相比之下，7H9L半固體培養(yǎng)基（一種高滲半固體培養(yǎng)基）成功分離出了結(jié)核桿菌L型菌株[1,2]。這表明培養(yǎng)基的選擇應(yīng)基于目標菌株的生物學(xué)特性，而非名稱的相似性。TBB培養(yǎng)基在乳制品梭菌檢測中是成熟可靠的工具，但在痰標本結(jié)核桿菌L型菌株的分離中，它并非合適的選擇。這一現(xiàn)象提醒我們，培養(yǎng)基的選擇必須與檢測目的精準匹配。TBB培養(yǎng)基的“?！痹谟谒缶鷻z測，其“不?！眲t體現(xiàn)在對其他菌種（如結(jié)核桿菌L型）的分離效果有限。在臨床細菌學(xué)檢驗中，理解每種培養(yǎng)基的設(shè)計原理和適用范圍，比盲目套用更為重要。
參考文獻
[1] 潘中華. 淺析痰標本在細菌學(xué)檢驗中的應(yīng)用[J]. 中國前沿, 2013(14): 175.
[2] 劉琳娟. 痰培養(yǎng)在細菌學(xué)檢驗中的應(yīng)用[J]. 醫(yī)學(xué)信息, 2013(25): 394.