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懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)在噬菌體研究中的多維應(yīng)用

2026/7/25 8:00:36 作者:觀微

噬菌體作為自然界中數(shù)量最豐富的生物實體,在致病菌生物防治和發(fā)酵食品微生態(tài)研究中極其重要。在各類噬菌體的分離、純化及特性表征實驗中,維持噬菌體顆粒的穩(wěn)定性與感染活性是研究成功的前提,而懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)正是實現(xiàn)這一目標(biāo)的核心試劑。作為一種經(jīng)典的鹽-鎂緩沖體系,懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)憑借其適宜的滲透壓和明膠保護(hù)機制,已成為現(xiàn)代噬菌體學(xué)研究不可或缺的基礎(chǔ)工具。

懸浮培養(yǎng)基(SM, 2%).png

在噬菌體的富集、純化與濃縮環(huán)節(jié),懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)發(fā)揮著關(guān)鍵的洗脫與重懸作用。在針對梨火疫病菌(Erwinia amylovora)噬菌體的研究中,研究人員在挑取單斑進(jìn)行純化以及使用PEG8000沉淀濃縮噬菌體后,均采用懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)對沉淀進(jìn)行重懸和濾膜過濾,從而獲得了高純度、高活性的噬菌體濃縮液,為后續(xù)的噬菌體“雞尾酒”組合篩選奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)[1]。同樣,在沙門氏菌噬菌體P-H9812的基因組提取實驗中,經(jīng)PEG8000沉淀后的噬菌體粗提物也是通過加入無菌的懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)輕輕吹打溶解,有效避免了噬菌體尾部結(jié)構(gòu)的機械損傷,保障了全基因組測序的高質(zhì)量完成[2]。

在噬菌體生物學(xué)特性的系統(tǒng)測定中,懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)是評估環(huán)境耐受性和感染動力學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)。在解析泡菜源植物乳植桿菌(Lactiplantibacillus plantarum)新型噬菌體ZH01的一步生長曲線時,研究者使用懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)對宿主菌體進(jìn)行多次洗滌和重懸,以徹底去除游離噬菌體,從而精準(zhǔn)測定了其30分鐘的潛伏期和爆發(fā)期[3]。此外,在評估噬菌體的酸堿耐受性和鹽度穩(wěn)定性時,懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)常被用作基礎(chǔ)稀釋液,例如,通過調(diào)節(jié)懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)的pH值或NaCl濃度,研究人員成功證實了沙門氏菌噬菌體和泡菜源噬菌體在極端pH和高鹽環(huán)境下的卓越存活能力[2][3]。

在體外抑菌實驗與防效評價體系中,懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)常被用作嚴(yán)謹(jǐn)?shù)年幮詫φ张c溶劑基準(zhǔn)。在梨火疫病菌噬菌體組合的生物膜抑制試驗及體外殺菌效果測定中,研究團(tuán)隊均設(shè)置了等量的懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)與宿主菌混合液作為對照組,以排除緩沖液本身對細(xì)菌生長或生物膜結(jié)晶紫染色的干擾,確保了殺菌率(>99%)數(shù)據(jù)的科學(xué)性與可靠性[1]。在測定噬菌體對有機溶劑的耐受性時,懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)也作為空白對照,幫助證實了沙門氏菌噬菌體P-H9812對氯仿、乙醇等試劑的不敏感性[2]。

綜上所述,懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)貫穿于噬菌體從環(huán)境樣品分離、分子生物學(xué)鑒定到應(yīng)用潛力評估的全生命周期。其配方中的Tris-HCl維持pH穩(wěn)定,NaCl提供滲透壓,MgSO?促進(jìn)噬菌體尾絲對宿主受體的吸附,而微量的明膠則有效防止了噬菌體在器皿表面的非特異性吸附。盡管不同研究會根據(jù)具體宿主菌微調(diào)配方,但懸浮培養(yǎng)基(SM,2%)的核心架構(gòu)始終是保障噬菌體實驗可重復(fù)性與數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的定海神針。

參考文獻(xiàn)

[1] 姜雪, 傅本重, 盛強, 等. 裂解梨火疫病菌的噬菌體分離、組合篩選及防病效果評價[J/OL]. 園藝學(xué)報, 2026. DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2026-0173.

[2] 陳強強, 徐??? 席圓圓, 等. 一株沙門氏菌噬菌體P-H9812的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究[J/OL]. 西南民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2026.

[3] 黃玉立, 葛黎紅, 楊夢露, 等. 一株新型泡菜源Lactiplantibacillus plantarum噬菌體ZH01的分離鑒定、生物學(xué)特性及全基因組分析[J/OL]. 微生物學(xué)通報, 2026. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.260525.

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