免疫球蛋白E（IgE）是介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)的核心分子，在變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、哮喘等過敏性疾病以及機(jī)體免疫應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在小鼠動物模型研究中，準(zhǔn)確、靈敏地定量檢測血清及相關(guān)體液中的IgE水平，是評估疾病嚴(yán)重程度、探究發(fā)病機(jī)制及評價藥物療效的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒具有高特異性、高靈敏度和操作便捷等優(yōu)勢，為廣大科研工作者在免疫學(xué)和藥理學(xué)研究中發(fā)揮了巨大的作用。
在變應(yīng)性鼻炎（AR）模型小鼠研究中的應(yīng)用
變應(yīng)性鼻炎（Allergic Rhinitis, AR）是一種由IgE介導(dǎo)的鼻黏膜慢性炎癥性疾病，近年來在兒童群體中的發(fā)病率逐年攀升。研究人員深入探討了中藥復(fù)方鼻敏通竅方治療兒童AR的藥效學(xué)作用及潛在機(jī)制。
該研究采用卵清白蛋白（OVA）致敏和滴鼻激發(fā)的方法，成功建立了BALB/c小鼠AR模型，并設(shè)置了空白組、模型組、鼻敏通竅方高/中/低劑量組及孟魯司特鈉陽性對照組。在關(guān)鍵的血清學(xué)檢測環(huán)節(jié)，研究人員嚴(yán)格使用小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對各組小鼠外周血清中的總IgE表達(dá)量進(jìn)行了精確定量。實驗結(jié)果顯示，模型組小鼠血清中總IgE的平均含量顯著高于空白組，而鼻敏通竅方各劑量組及孟魯司特鈉組小鼠血清總IgE水平均顯著低于模型組。該研究從免疫學(xué)角度有力證實了鼻敏通竅方能夠有效下調(diào)IgE的高表達(dá)，緩解AR模型小鼠的過敏反應(yīng)，并進(jìn)一步結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)和免疫組化技術(shù)，揭示了該方可能通過影響CCR3、CCL5、CCL11等趨化因子的表達(dá)，抑制嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）向鼻黏膜浸潤，從而發(fā)揮抗過敏、抗炎的治療作用[1]。
在特應(yīng)性皮炎-哮喘模型小鼠研究中的應(yīng)用
特應(yīng)性皮炎（Atopic Dermatitis, AD）是一種慢性過敏性皮膚病，臨床研究發(fā)現(xiàn)AD患兒在成長過程中常并發(fā)哮喘等氣道過敏性疾病，這種現(xiàn)象引起了學(xué)界的廣泛關(guān)注。在《曲安奈德外用對特應(yīng)性皮炎-哮喘模型小鼠MIF、IgE表達(dá)及氣道高反應(yīng)性的影響》一文中，探究了中效糖皮質(zhì)激素曲安奈德（TAA）外用對AD-哮喘復(fù)合模型小鼠的治療作用及機(jī)制。
研究者采用二硝基氯苯（DNCB）和OVA聯(lián)合誘導(dǎo)的方法建立了BALB/c小鼠AD-哮喘模型。為了全面評估小鼠的免疫狀態(tài)和氣道炎癥水平，研究團(tuán)隊使用小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒以及IL-4、IFN-γ、MIF等ELISA試劑盒，系統(tǒng)檢測了小鼠血清及肺泡灌洗液（BALF）中多種免疫指標(biāo)的表達(dá)水平。結(jié)果表明，與正常對照組相比，模型組小鼠血清及BALF中的IgE、IL-4和MIF水平均顯著升高（P<0.05），而IFN-γ水平顯著降低，提示AD-哮喘小鼠存在明顯的Th1/Th2免疫失衡。經(jīng)TAA外用治療后，小鼠血清及BALF中的IgE、IL-4、MIF水平均顯著降低（P<0.05），IFN-γ水平回升[2]。該研究充分利用小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒對IgE進(jìn)行定量分析，證實了TAA可通過調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡、降低IgE和MIF表達(dá)來減輕AD-哮喘模型小鼠的皮膚炎癥及氣道高反應(yīng)性，為臨床AD并發(fā)哮喘的治療提供了新的實驗依據(jù)。
在LPS所致免疫應(yīng)激小鼠研究中的應(yīng)用
除了過敏性疾病，IgE等免疫球蛋白在機(jī)體應(yīng)對細(xì)菌內(nèi)毒素等引起的免疫應(yīng)激反應(yīng)中也扮演著重要角色。文中探討了天然植物提取物牛至香酚對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的免疫應(yīng)激小鼠的保護(hù)作用。
該研究將健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分為空白對照組、模型組及牛至香酚高、中、低劑量組，通過腹腔注射LPS建立免疫應(yīng)激模型。在檢測指標(biāo)方面，研究者主要采用ELISA法測定血清中細(xì)胞因子（IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α）的含量，同時使用免疫比濁法檢測了免疫球蛋白（IgM、IgG、IgA）及補(bǔ)體（C3、C4）的水平。該研究未直接使用小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒檢測IgE，但其研究思路和實驗方法充分展示了ELISA技術(shù)在評估小鼠免疫應(yīng)激狀態(tài)下血清免疫球蛋白及細(xì)胞因子變化中的核心地位。研究結(jié)果表明，牛至香酚能有效抑制LPS免疫應(yīng)激小鼠促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌，促進(jìn)抗炎因子IL-10的分泌，從而減輕炎癥反應(yīng)[3]。這提示我們，在更為廣泛的免疫學(xué)研究中，包括小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒在內(nèi)的各類ELISA檢測工具，能夠為全面揭示藥物對機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)機(jī)制提供可靠的數(shù)據(jù)支撐。
小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒的技術(shù)優(yōu)勢與實驗要點
綜合上述研究可以看出，ELISA技術(shù)因其高靈敏度、高特異性和良好的重復(fù)性，已成為小鼠模型研究中檢測血清及BALF等樣本中IgE及其他免疫指標(biāo)的常用方法。小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒通常采用雙抗體夾心法，通過特異性捕獲抗體和酶標(biāo)檢測抗體與樣本中的IgE結(jié)合，經(jīng)TMB顯色后在450nm波長下測定OD值，即可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線精確計算出樣本中IgE的濃度。
在實際操作中，使用小鼠免疫球蛋白E(IgE)Elisa試劑盒時需注意以下要點：①樣本采集后應(yīng)盡早檢測，避免反復(fù)凍融。②嚴(yán)格設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔和復(fù)孔，以確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。③洗滌步驟至關(guān)重要，洗滌不充分易導(dǎo)致非特異性結(jié)合，影響結(jié)果。④顯色反應(yīng)需避光進(jìn)行，并在加入終止液后15分鐘內(nèi)完成酶標(biāo)儀讀數(shù)。
參考文獻(xiàn)
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[2] 戚敏敏, 寧維翾, 應(yīng)航宇. 曲安奈德外用對特應(yīng)性皮炎-哮喘模型小鼠MIF、IgE表達(dá)及氣道高反應(yīng)性的影響[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)生, 2022, 60(13): 20-24.
[3] 王文玫, 馬玉芳. 牛至香酚對LPS所致免疫應(yīng)激小鼠血清免疫球蛋白、補(bǔ)體及細(xì)胞因子含量的影響[J]. 中獸醫(yī)學(xué)雜志, 2024(1): 7-9.