背景及概述[1][2]
桑葉異名鐵扇子，為桑科屬桑(Morus alba L.)的樹葉。桑葉甘、苦、寒，歸肺、肝經(jīng)，能疏散風(fēng)熱，清肺潤燥，清肝明目，中醫(yī)用它治療風(fēng)熱感冒，肺熱燥咳，頭昏頭痛，目赤昏花，現(xiàn)代藥理學(xué)證實(shí)，桑葉可抑制血糖升高，具有預(yù)防和治療糖尿病的作用。桑葉中含有豐富的蕓香甙、槲皮素、異槲皮素以及槲皮素-3-葡萄糖甙等黃酮類化合物，含量約在3％左右。藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，桑葉黃酮具有較強(qiáng)的抗氧化功能、降血脂功能以及通過抑制大鼠小腸雙糖酶活性而具有顯著的降血糖作用。鑒于桑葉黃酮具有多種多樣的生物活性，桑葉黃酮在醫(yī)藥和食品領(lǐng)域作為天然藥物、天然抗氧化劑有廣泛的應(yīng)用前景。至目前為止，尚未見有關(guān)從藥用植物桑葉中大量提取桑葉黃酮的提取方法報(bào)道。
應(yīng)用[3]
現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，桑葉提取物在治療糖尿病、高血壓、高血脂等癥及抗衰老、抗病毒、抗炎等方面都具有良好的療效，這與桑葉中的黃酮、多糖和生物堿等有效成分密切相關(guān)，其中桑葉黃酮的藥理活性最為顯著。因此，近年來人們已經(jīng)開始越來越多地關(guān)注到桑葉黃酮、多糖和生物堿等藥用成分資源的綜合利用與開發(fā)。
目前，有關(guān)桑葉中有效成分的提取方法已經(jīng)有一些相關(guān)專利報(bào)道，如CN1683360公開了分別采用乙醇和水為提取劑和洗脫劑，利用大孔吸附樹脂提取分離桑葉黃酮的方法，CN1351085公開了一種從桑葉中提取分子量在15000-50000道爾頓之間的桑葉多糖組分的方法，CN1338275公開了從桑葉中提取具有α-糖苷酶抑制劑活性的桑葉總生物堿的制備方法，CN1762428公開了利用超臨界CO2從桑葉中萃取脫氧野尻酶素類生物堿和黃酮兩種有效成分的方法，CN1850166公開了從桑葉中制備多糖和生物堿的分離方法并以此制備了桑葉黃酮有效組分組合物，CN1589835公開了含有桑葉黃酮、桑葉多酚、桑葉多糖、DNJ、GABA等多種生物活性成分的桑葉提取物及其用途。
以上專利對桑葉有效部位提取工藝大多是針對單一的黃酮或多糖或生物堿，或其中的兩種有效部位，未見以桑葉黃酮、多糖及生物堿三者為目標(biāo)的復(fù)合提取工藝，沒有實(shí)現(xiàn)聯(lián)產(chǎn)桑葉黃酮、多糖及生物堿三種藥用成分，極大的浪費(fèi)了寶貴的桑葉資源。
雖然現(xiàn)有技術(shù)表明桑葉中的黃酮、多糖及生物堿等單一的活性物質(zhì)都有相關(guān)的提取工藝，但未從綜合利用藥用成分資源的角度深度開發(fā)桑葉資源，未形成一套提取桑葉中典型三大活性物質(zhì)的復(fù)合工藝，對復(fù)合提取桑葉中的桑葉黃酮、多糖及生物堿的應(yīng)用研究缺乏基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。因而，開發(fā)聯(lián)產(chǎn)桑葉黃酮、多糖及生物堿的復(fù)合提取工藝制備相應(yīng)的提取物，適于工業(yè)化生產(chǎn)，為其在醫(yī)藥、保健、食品、化妝品等工業(yè)上開拓新市場具有十分重要的意義。
制備[2]
稱取500g桑葉，粉碎過20目篩，用80％的乙醇溶液3升、2升、2升分三次回流提取，首次回流2.0小時(shí)，二次、三次分別回流1.0小時(shí)，合并提取液，冷藏靜置24小時(shí)，過濾，濾液減壓濃縮得乙醇提取物；乙醇提取物用水分別提取五次，每次500ml，提取1小時(shí)，溫度保持在75℃，合并水提取液，靜置過濾、減壓濃縮至約2升；用鹽酸調(diào)pH值為3.5；加入NaCl使鹽含量為3％；濃縮液上柱分離，其柱高為60cm，柱徑為3.0cm，柱填料為D101大孔吸附樹脂，先用水淋洗至流出液變清后，改用40％乙醇淋洗5倍柱體積，淋洗速度為：20ml/min，收集淋洗液，減壓濃縮、真空干燥即得棕黃色的桑葉黃酮產(chǎn)物。以蘆丁為對照品，利用差示分光光度法測定桑葉總黃酮的含量，桑葉黃酮含量為61％。
制備高純度桑葉黃酮的方法：
取1kg干燥桑葉(桑葉黃酮含量3％)，粉碎，加入10Lph10的氫氧化鈣溶液，加熱至50℃動態(tài)提取2小時(shí)，提取兩次，合并提取液濾過鹽酸調(diào)ph至5加入500mlD101樹脂柱吸附，水洗中性，2.5L65％乙醇洗脫桑葉黃酮，減壓濃縮至密度1.2，加入20g聚酰胺，烘干和100g新聚酰胺一起裝柱，依次用800ml水→500ml30％乙醇→600ml75％乙醇洗脫，收集桑葉黃酮流分加入鹽酸調(diào)ph至1靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物再用75％乙醇回流溶解靜置結(jié)晶2次，濾出結(jié)晶，干燥得桑葉黃酮21g，含量95％。
主要參考資料
[1] 王芳, 喬璐, 淡小艷, & 褚鳳嬌. (2011). 桑葉黃酮的提取及抗氧化研究. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué), 38(15), 76-79.
[2] 原愛紅, 黃哲, 馬駿, 蔣曉峰, 孔憲濤, & 李素. (2004). 桑葉黃酮的提取及其降糖作用的研究. 中草藥, 35(11), 1242-1243.
[3] 李向榮, 方曉, & 俞靈鶯. (2005). 桑葉黃酮抗氧化及抑制蛋白糖基化作用. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版), 31(2), 203-206.