T-47D人乳腺管癌細(xì)胞
| 中文名稱 | T-47D人乳腺管癌細(xì)胞 |
|---|---|
| 中文同義詞 | T-47D人乳腺管癌細(xì)胞 |
| 英文名稱 | T-47D human breast duct cancer cells |
| 英文同義詞 | Human T-47D;T-47D human breast duct cancer cells |
| CAS號 | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS號 | |
| 相關(guān)類別 | 細(xì)胞-細(xì)胞系;細(xì)胞系-human細(xì)胞系 |
| Mol文件 | Mol File |
| 結(jié)構(gòu)式 |
T-47D人乳腺管癌細(xì)胞 性質(zhì)
T-47D人乳腺管癌細(xì)胞分離自一位54歲乳房侵入性導(dǎo)管癌的女性患者胸水；發(fā)現(xiàn)分化的上皮亞株(T-47D)有細(xì)胞質(zhì)連接和17-β-雌二醇及其他類固醇降血鈣素的受體，T-47D細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因。
T-47D人乳腺管癌細(xì)胞
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；添加0.01mg/ml胰島素；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
上皮細(xì)胞樣(卵圓形或多邊形)1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s，吸走潤洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層；4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定）浸潤性導(dǎo)管癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性；54歲貼壁細(xì)胞