關(guān)鍵詞:TNF-alpha、腫瘤壞死因子、重組蛋白、炎癥、免疫調(diào)控、細(xì)胞凋亡、N-His、哺乳動物表達(dá)
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一、TNF-alpha:分子結(jié)構(gòu)與生物學(xué)功能
TNF-alpha(Tumor Necrosis Factor-alpha)是由 TNF 基因編碼的多功能促炎細(xì)胞因子,屬于腫瘤壞死因子超家族成員。TNF-alpha 通過結(jié)合 TNF 受體 TNFR1 和 TNFR2,啟動下游 NF-κB 通路、MAPK 級聯(lián)反應(yīng)以及 caspase 家族介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號通路,廣泛調(diào)控炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答、細(xì)胞增殖、分化和凋亡等生物學(xué)過程。本產(chǎn)品為重組人 TNF-alpha 蛋白(Val77-Leu233),采用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),N端攜帶 His 標(biāo)簽,經(jīng)純化后獲得高純度蛋白。
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TNF-alpha 的核心生理功能包括:
炎癥與免疫調(diào)控:TNF-alpha 是炎癥反應(yīng)的主要調(diào)節(jié)因子,可誘導(dǎo) IL-1、IL-6、IL-8 等多種炎癥因子的分泌,促進(jìn)免疫細(xì)胞活化與募集,在感染防御和自身免疫性疾病中發(fā)揮關(guān)鍵作用;
細(xì)胞凋亡與增殖調(diào)控:TNF-alpha 通過 TNFR1 信號通路激活 caspase 家族介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和壞死性凋亡,同時對多種腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒性作用;
腫瘤生物學(xué)關(guān)聯(lián):TNF-alpha 因能誘導(dǎo)某些腫瘤的出血性壞死而得名,在腫瘤發(fā)生發(fā)展中呈現(xiàn)雙重作用——既可抑制腫瘤生長,也可促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移;
多種疾病關(guān)聯(lián):TNF-alpha 在感染性休克、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病、銀屑病等自身免疫性和炎癥性疾病中起重要作用,是重要的臨床治療靶點(diǎn)。
表達(dá)與分布:TNF-alpha 主要由活化的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌。重組 TNF-alpha 蛋白可作為細(xì)胞培養(yǎng)添加劑、免疫原、WB/ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品用于基礎(chǔ)與轉(zhuǎn)化研究。
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二、TNF-alpha 重組蛋白的科研核心價值
高質(zhì)量重組 TNF-alpha 蛋白在多領(lǐng)域研究中具有不可替代的應(yīng)用價值:
炎癥與免疫學(xué)研究:用于誘導(dǎo)多種細(xì)胞類型的炎癥反應(yīng),研究免疫細(xì)胞活化、炎癥信號通路及炎癥因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò);
細(xì)胞凋亡與細(xì)胞毒性研究:用于腫瘤細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)實(shí)驗,研究 TNF-alpha 介導(dǎo)的細(xì)胞死亡信號通路;
腫瘤生物學(xué)研究:分析 TNF-alpha 對腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、侵襲的調(diào)控作用,探索腫瘤微環(huán)境中 TNF-alpha 的雙重功能;
免疫檢測標(biāo)準(zhǔn)品:可作為 Western Blot、ELISA 的陽性對照或定量標(biāo)準(zhǔn)品,建立檢測方法;
抗體篩選與免疫原:用于制備抗人 TNF-alpha 單克隆/多克隆抗體,或作為免疫原進(jìn)行動物免疫;
藥物開發(fā)與活性測試:在細(xì)胞水平測試候選化合物對 TNF-alpha/TNFR 信號通路的調(diào)控作用,篩選 TNF-alpha 抑制劑。
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三、蛋白純度與質(zhì)檢驗證(SDS-PAGE)
本產(chǎn)品經(jīng) SDS-PAGE 驗證,純度 > 90%,滿足大多數(shù)免疫檢測及細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗要求。代表性 SDS-PAGE 結(jié)果顯示:在約 18.58 kDa 位置出現(xiàn)單一主條帶,與預(yù)測分子量一致,無明顯降解或聚集條帶。
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圖注:Lane 1:分子量標(biāo)記;Lane 2:還原條件下 Recombinant Human TNFa/TNF-alpha Protein, N-His,可見清晰單一條帶,純度>90%。
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四、高品質(zhì) Recombinant Human TNFa/TNF-alpha Protein, N-His 核心參數(shù)與技術(shù)優(yōu)勢
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哺乳動物細(xì)胞 (Mammalian Cells)
ELISA、免疫原(Immunogen)、SDS-PAGE、WB、生物活性測試(進(jìn)行中)
凍干前溶液:PBS (pH 7.4),1mM EDTA,4% 海藻糖,1% 甘露醇
一般為凍干粉或冷凍液體,干冰/藍(lán)冰運(yùn)輸
頻繁使用:2-8℃;長期保存:-20至-80℃,自收貨之日起12個月。避免反復(fù)凍融,使用手動除霜冰箱。
核心產(chǎn)品參數(shù)
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技術(shù)優(yōu)勢
哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):更接近天然蛋白的翻譯后修飾,有利于保持 TNF-alpha 的正確構(gòu)象和生物活性;
N-His 標(biāo)簽設(shè)計:His 標(biāo)簽便于通過親和層析進(jìn)行高純度純化,同時兼容 Ni-NTA 親和檢測體系,便于蛋白的檢測與追蹤;
高純度(>90%):經(jīng) SDS-PAGE 驗證,非特異性背景低,滿足 ELISA、WB 及免疫原制備等應(yīng)用要求;
多應(yīng)用場景:已驗證可用于 ELISA、免疫原、SDS-PAGE、WB,生物活性測試進(jìn)行中;
優(yōu)化凍干配方:含海藻糖和甘露醇作為凍干保護(hù)劑,提高蛋白長期穩(wěn)定性;PBS 體系兼容多數(shù)下游實(shí)驗。
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FAQ(高頻問題)
1. 該重組蛋白的活性如何?是否適用于細(xì)胞培養(yǎng)?
目前生物活性測試正在進(jìn)行中。如需最新活性數(shù)據(jù),可聯(lián)系技術(shù)支持獲取。
2. 如何復(fù)溶和保存?
打開管蓋前短暫離心,加入無菌水復(fù)溶配制儲備液。復(fù)溶后可分裝凍存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融。
3. N端的 His 標(biāo)簽會影響 TNF-alpha 的功能嗎?
His 標(biāo)簽位于蛋白 N 端,通常不影響 TNF-alpha 與其受體的結(jié)合及下游信號傳導(dǎo)。若實(shí)驗對標(biāo)簽非常敏感,可咨詢技術(shù)支持。
4. 可以用于 Western Blot 的陽性對照嗎?
可以。本品已驗證適用于 WB,使用抗 TNF-alpha 抗體或抗 His 標(biāo)簽抗體均可檢測。
5. 該蛋白是否適合制備抗體?
可以。本品純度>90%,可作為免疫原免疫動物(兔、小鼠等)制備多克隆或單克隆抗體。
6. 本產(chǎn)品與天然 TNF-alpha 的序列差異?
本產(chǎn)品為重組人 TNF-alpha 片段(Val77-Leu233),N 端添加了 His 標(biāo)簽用于純化和檢測。
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訂購信息
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更多信息和產(chǎn)品購買請聯(lián)系:
AntibodySystem 亞洲獨(dú)家授權(quán)合作伙伴,提供高品質(zhì)重組蛋白、抗體、ELISA 試劑盒與一站式實(shí)驗解決方案。
注:如需內(nèi)毒素檢測服務(wù)、活性測試方案或大批量定制需求,請咨詢技術(shù)支持。