小鼠DNASE1L3重組蛋白相關(guān)背景，制備該靶點(diǎn)單克隆抗體的核心流程如下：
1. 免疫動(dòng)物
選用6-8周齡純種BALB/C雌性小鼠，以純化的小鼠DNASE1L3重組蛋白作為免疫原，與佐劑按1:1體積比乳化后進(jìn)行免疫：首次免疫用完全弗氏佐劑，后續(xù)加強(qiáng)免疫用不完全弗氏佐劑，皮下注射，免疫周期約2個(gè)月，融合前3天加強(qiáng)免疫。
2. 細(xì)胞融合
無(wú)菌取免疫小鼠的脾臟制備脾細(xì)胞，與小鼠骨髓瘤細(xì)胞按比例混合，加入PEG誘導(dǎo)融合，用HAT選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)，僅融合成功的雜交瘤細(xì)胞可存活增殖。
3. 篩選與克隆化
通過(guò)ELISA法篩選出能分泌抗DNASE1L3特異性抗體的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞，用有限稀釋法進(jìn)行至少3輪克隆化，獲得穩(wěn)定分泌目標(biāo)抗體的單克隆細(xì)胞株。
4. 大量制備
可選擇兩種方式生產(chǎn)抗體：體內(nèi)誘生法將陽(yáng)性細(xì)胞注射入小鼠腹腔，收集腹水獲取高濃度抗體；體外培養(yǎng)法收集細(xì)胞上清液，后續(xù)對(duì)抗體進(jìn)行純化、鑒定特異性與純度后即可投入使用。