替爾泊肽(tirzepatide)是禮來旗下的GIP/GLP-1雙受體激動劑，2025年其原研制劑全年銷售額表現(xiàn)亮眼，穩(wěn)居GLP-1賽道頭部產(chǎn)品。
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然而，在龐大市場需求的誘惑下，美國市場亂象叢生。美國市場上，大量復(fù)方藥房、遠(yuǎn)程醫(yī)療公司、醫(yī)美機構(gòu)打著“個性化用藥” 的旗號，將替爾泊肽與維生素B12（甲鈷胺、羥鈷胺或氰鈷胺）混合，自制所謂 “復(fù)方替爾泊肽” 對外銷售。這類產(chǎn)品宣傳售價更低、療效優(yōu)于 FDA 獲批原研藥，但整套配比、安全性、藥效均未開展規(guī)范驗證。
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2026年3月12日，禮來公司官網(wǎng)發(fā)布公開信，向臨床醫(yī)療機構(gòu)與全體患者發(fā)布安全警示。
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禮來對美國市面流通的替爾泊肽-B12復(fù)配制劑開展專項檢測，結(jié)果存在重大安全隱患：替爾泊肽可與B12發(fā)生自發(fā)化學(xué)反應(yīng)，生成全新未被報道的共價雜質(zhì)。全部10份市售送檢樣品均檢出該共價雜質(zhì)，雜質(zhì)峰值最高占樣品總多肽含量的10%
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01?雜質(zhì)的“現(xiàn)形”：UPLC-MS一錘定音
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禮來研發(fā)團隊同步在《Expert Opinion on Drug Safety》刊發(fā)同行評議原創(chuàng)論文，完整完成該雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)表征。
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研究團隊分別對市售復(fù)配樣品、FDA 批準(zhǔn)純替爾泊肽原料藥開展UPLC-MS色譜對照檢測。
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結(jié)果對比差異顯著（圖1）： 純替爾泊肽原料藥色譜基線平穩(wěn)，僅存在替爾泊肽主峰，無額外雜峰； 混入B12的復(fù)配樣品多出多重雜峰：峰1為游離維生素B12，峰2為制劑輔料苯甲醇；風(fēng)險核心為保留時間 28.08 分鐘的峰3，該峰在純替爾泊肽原料中完全不存在。
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放大觀測可見，雜質(zhì)峰3緊貼替爾泊肽主峰（峰4，保留時間28.37分鐘），常規(guī)液相色譜條件下二者無法有效分離。
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圖 1. (A) 替爾泊肽 + B12 復(fù)配制劑；(B) 純替爾泊肽原料藥 UPLC-MS 圖譜；(C) 為A圖峰3、峰4放大視圖。峰歸屬：1) B12；2) 苯甲醇；3) B12 - 替爾泊肽共價加合物；4) 替爾泊肽。峰 1、2、3 均不存在于純替爾泊肽原料藥中。
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借助高分辨質(zhì)譜完成精準(zhǔn)分子量測定，結(jié)合圖2分子結(jié)構(gòu)推導(dǎo)，研究團隊明確了峰3雜質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)：
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圖2: 反應(yīng)圖詳細(xì)展示了B12-替爾泊肽加合物的形成過程。(A) 為羥鈷胺的結(jié)構(gòu); (B) 為替爾泊肽的結(jié)構(gòu); (C) 縮合反應(yīng)產(chǎn)物替爾泊肽 - B12 加合物
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l 該未知雜質(zhì)高分辨質(zhì)譜實測完整分子量6138.07 Da；
l 原料單同位素精確分子量：替爾泊肽4810.52 Da，羥鈷胺1345.57 Da，水分子分子量18.01 Da。
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理論分子量計算公式：4810.52+1345.57?18.01=6138.08 Da ，理論計算值與質(zhì)譜實測值僅相差0.01 Da，屬于高分辨質(zhì)譜儀器正常精度誤差，數(shù)據(jù)完全自洽。
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該數(shù)據(jù)證實：1分子羥鈷胺與1分子替爾泊肽發(fā)生縮合反應(yīng)，脫去1分子水，生成穩(wěn)定性極強的替爾泊肽-B12共價加合物，即色譜檢出的雜質(zhì)峰3。
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02 NMR實驗揭示結(jié)構(gòu)改變
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UPLC-MS 完成雜質(zhì)定性，核磁共振(NMR)多組實驗進(jìn)一步驗證分子結(jié)合后替爾泊肽空間構(gòu)象變化。禮來團隊采用4套 NMR 檢測方案，多維數(shù)據(jù)交叉佐證 B12 與替爾泊肽結(jié)合會永久改變多肽分子結(jié)構(gòu)：
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1D擴散過濾NMR（圖3）：混合體系中B12核磁信號發(fā)生顯著偏移，僅當(dāng)兩種分子穩(wěn)定結(jié)合時才會出現(xiàn)該特征；二維1H-13C HSQC實驗（圖4）在混合樣品中檢出B12全新共振峰，證明結(jié)合后B12分子出現(xiàn)全新空間構(gòu)象。
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圖3. 1D 擴散過濾質(zhì)子核磁譜驗證替爾泊肽與B12存在分子相互作用。黑色曲線：純替爾泊肽；紅色曲線：純 B12；藍(lán)色曲線：1:1 摩爾比混合樣品。A 為完整質(zhì)子譜，B 為酰胺質(zhì)子區(qū)域，C 為B12特征共振區(qū)域。
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圖 4. 二維 1H-13C HSQC核磁圖譜證實二者相互作用。絳紅色：純替爾泊肽；藍(lán)色：純B12；綠色：1:1 混合樣品。左上角局部放大圖直觀體現(xiàn)B12峰形、化學(xué)位移大幅改變。
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核心證據(jù)為二維1H-1?N HSQC多肽指紋圖譜（圖5），該技術(shù)對多肽酰胺主鏈結(jié)構(gòu)高度敏感，分子二級、三級構(gòu)象改變會直接改變峰信號。圖譜可見，混入B12后替爾泊肽大量特征峰消失，證明多肽空間構(gòu)象發(fā)生不可逆改變。
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圖 5. 二維1H-1?N HSQC核磁證明替爾泊肽結(jié)合B12后分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。絳紅色峰：純替爾泊肽；藍(lán)青色峰：純B12；綠色峰：1:1 混合樣品。
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擴散核磁與弛豫時間數(shù)據(jù)補充分子作用佐證：
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B12的T1/T2比值由3.15提升至12.32，漲幅近3倍；替爾泊肽比值由33.86升至42.11；兩組分子擴散速率同步下降，代表復(fù)合分子流體力學(xué)體積增大、溶液中分子翻滾速率變慢，符合穩(wěn)定共價加合物的理化特征。
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四組核磁檢測數(shù)據(jù)相互印證，形成完整證據(jù)鏈，證實替爾泊肽與羥鈷胺發(fā)生穩(wěn)定共價結(jié)合并改變多肽天然構(gòu)象。
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03?未知的多重安全風(fēng)險
該加合雜質(zhì)的人體安全影響暫無任何驗證數(shù)據(jù)，全部短期、長期風(fēng)險均無法評估。
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禮來公開信明確表述：目前暫無該雜質(zhì)對人體短期/長期毒性、GIP/GLP-1受體結(jié)合能力、免疫原性、體內(nèi)吸收分布代謝排泄的相關(guān)研究數(shù)據(jù)，所有影響均處于未知狀態(tài)。
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多重未知風(fēng)險疊加，存在明確安全隱患：
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第一，藥效存在不可控變化風(fēng)險。NMR數(shù)據(jù)證實替爾泊肽結(jié)合B12后空間結(jié)構(gòu)改變，多肽三級結(jié)構(gòu)直接決定藥理活性，結(jié)構(gòu)變異會導(dǎo)致受體結(jié)合能力波動，可能出現(xiàn)藥效下降、藥效異常增強，甚至產(chǎn)生全新非預(yù)期藥理作用。?
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第二，免疫原性風(fēng)險升高。多肽類藥物替爾泊肽與外源小分子羥鈷胺發(fā)生共價修飾后，分子整體分子量顯著升高，更易誘發(fā)人體免疫應(yīng)答，產(chǎn)生特異性抗體，輕則藥物失效，重則誘發(fā)嚴(yán)重全身過敏反應(yīng)。?
第三，體內(nèi)藥代行為完全不可預(yù)測。分子量由4810.52 Da提升至6138.07 Da，疊加構(gòu)象改變，會徹底改變藥物吸收、組織分布、代謝、清除路徑，雜質(zhì)在人體體內(nèi)的滯留時長、蓄積部位、清除方式均無研究支撐。
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第四，監(jiān)管管控存在空白。自制復(fù)配制劑生產(chǎn)機構(gòu)無強制不良事件監(jiān)測、上報義務(wù)；FDA FAERS 數(shù)據(jù)庫已收錄數(shù)百例復(fù)方替爾泊肽相關(guān)不良事件，但真實發(fā)生數(shù)量遠(yuǎn)高于上報數(shù)據(jù)，大量不良反應(yīng)無法被監(jiān)管捕捉。
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04 結(jié)語
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替爾泊肽與B12的隨意混合并非經(jīng)過理性設(shè)計的復(fù)方制劑，而是在監(jiān)管漏洞下、未開展任何安全性評價的非正式人體試驗，受試人群為海量普通患者。
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最高占比可達(dá)總多肽10%的未知共價雜質(zhì)，伴隨分子結(jié)構(gòu)改變、藥理與毒性完全未知，隨注射制劑直接進(jìn)入人體，短期、長期健康危害均無明確結(jié)論。替爾泊肽-B12雜質(zhì)的發(fā)現(xiàn)，為所有多肽復(fù)配制劑敲響質(zhì)量警鐘。復(fù)雜生物多肽與各類輔料隨意混合，極易自發(fā)生成結(jié)構(gòu)不明、存在安全隱患的全新雜質(zhì)。
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如果您正在進(jìn)行復(fù)雜多肽制劑的研究，面對未知雜質(zhì)研究的難題，歡迎提出您的需求。QCS藥物研發(fā)中心專注于藥物對照品與雜質(zhì)研究，致力于為全球制藥行業(yè)提供?高純度、可追溯、標(biāo)準(zhǔn)化?的藥物對照品及特殊小分子解決方案。我們以“讓藥品更安全”為使命，愿與您共同推動藥物研究安全發(fā)展。
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參考文獻(xiàn)：
[1] Jordan B, Arbogast L, Clemens M, et al. A novel, widespread impurity in mass-compounded tirzepatide/B12 products[J]. Expert Opinion on Drug Safety, 2026, 25(5):837-845.https://doi.org/10.1080/14740338.2026.2663185
[2] Eli Lilly and Company. An open letter warning of potential patient safety risks associated with tirzepatide compounded with vitamin B12[EB/OL]. 2026-03-12.
QCS藥物研發(fā)中心持續(xù)關(guān)注雜質(zhì)研究前沿，可提供藥物全生命周期質(zhì)量控制所需各類雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品支持。如需了解更多產(chǎn)品信息，歡迎隨時聯(lián)系我們。
