一、什么是蛋白質(zhì)乙?；?

通過乙?；D(zhuǎn)移酶(KAT/HAT)催化下，將乙酰輔酶A(Ac-CoA)的乙?；?-COCH3)共價連接到蛋白質(zhì)特定氨基酸殘基上的過程，主要發(fā)生在賴氨酸側(cè)鏈(由賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶KAT/HAT催化)或蛋白質(zhì)N端(由N-a-乙酰轉(zhuǎn)移酶NATs催化)。

通過對賴氨酸或N端氨基的乙酰化，中和其原有的正電荷，改變蛋白質(zhì)局部電荷環(huán)境與空間構(gòu)象，影響染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、基因轉(zhuǎn)錄活性和蛋白質(zhì)功能：

其中組蛋白乙?；ㄟ^松弛染色質(zhì)促進基因表達，非組蛋白乙?；瘎t調(diào)控細胞周期、代謝通路及疾病發(fā)生。

賴氨酸乙?；梢阴＾D(zhuǎn)移酶(KAT)催化，由去乙?；?HDAC/Sirtuin)去除，呈現(xiàn)動態(tài)可逆的雙向調(diào)控;而N端乙?；诖蠖鄶?shù)情況下為不可逆修飾。

二、主要有哪幾類

1、NE-乙?；?賴氨酸乙?；?：乙?；砑拥劫嚢彼醾?cè)鏈E位的伯胺上，可逆調(diào)節(jié)賴氨酸正電荷，改變蛋白構(gòu)象、穩(wěn)定性及與DNA/其他蛋白互作

2、Na-乙?；?蛋白質(zhì)N端乙?；?：由N-a-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NATs)催化，在蛋白質(zhì)N端氨基添加乙?；?，在翻譯過程中或剛完成時催化，影響蛋白折疊、亞細胞定位及降解，多為不可逆(在哺乳動物中N端乙酰化被認為是不可逆的，沒有已知的去乙?；?

3、O-乙?；?低頻)：乙?；?CH3CO-)連接到羥基(-OH)氧原子上的一類修飾，在蛋白質(zhì)中主要發(fā)生在絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸側(cè)鏈羥基，也見于多糖/糖蛋白/脂質(zhì)的糖基羥基上，頻率較低，但也參與蛋白功能調(diào)控，不改變電荷，主要影響空間位阻、氫鍵、疏水作用，但整體研究較少、大量機制不明。

三、有哪些生物學功能?

1、基因表達調(diào)控：組蛋白乙?；伤沙谌旧|(zhì)結(jié)構(gòu)，促進轉(zhuǎn)錄因子和RNA聚合酶結(jié)合DNA，從而激活基因表達

2、蛋白功能調(diào)節(jié)：非組蛋白乙?；烧{(diào)控蛋白穩(wěn)定性、酶活性、亞細胞定位及蛋白-蛋白相互作用。例如，p53K382位點乙?；勺柚蛊浣到猓娱L半衰期

3、細胞生理過程：參與細胞周期、代謝調(diào)控、DNA損傷修復、免疫應答及精子功能等

4、蛋白穩(wěn)態(tài)調(diào)控：N端乙?；杀Ｗo蛋白免于降解識別，調(diào)控蛋白質(zhì)組穩(wěn)定性，并與自噬及泛素-蛋白酶體系統(tǒng)互作

四、怎么檢測?

1、Western blot：(直接WB和IP-WB經(jīng)典法)檢測賴氨酸乙?；?檢測特定蛋白的乙?；沈炞C蛋白是否發(fā)生乙?；⑺幬?處理前后乙?；礁叩?，適用于大批量樣本快速篩查，已知蛋白、已知位點驗證，上下游調(diào)控驗證，組蛋白乙?；Ｒ?guī)檢測、機制初步驗證等。

2、免疫熒光/免疫組化：用乙酰化特異性抗體染色，看乙酰化蛋白定位、組織分布、高低表達差異，適用于定位分析、組織水平整體觀察、細胞亞群差異、藥物/模型藥效評價、不能提蛋白的樣本。

3、質(zhì)譜法：高分辨率定位乙酰化位點，蛋白提取、酶解，乙?；亩翁禺愋愿患筮M行質(zhì)譜檢測，可用于初篩差異乙酰化位點、找新靶點、疾病模型修飾譜；

4、放射性標記法：用于特定實驗條件下的乙?；瘷z測，外源3H-乙酸被細胞攝取>轉(zhuǎn)化為3H-乙酰CoA>在乙酰轉(zhuǎn)移酶作用下，把帶放射性的乙?；拥降鞍踪嚢彼?Ser/Thr殘基上，最后通過放射性信號直接定量、定位蛋白乙?；?；有放射性危害，需要同位素實驗室資質(zhì)、防護和廢物處理，只能定量整體乙酰化水平，無法區(qū)分具體乙?；稽c，操作繁瑣周期長。