??貼壁細胞傳代
1?? 準備工作
超凈臺紫外滅菌30min，把培養(yǎng)基、胰酶、PBS提前放進37℃水浴鍋預熱? 離心管、移液管、槍頭等耗材可以一起照！
2?? 棄舊液+清洗
拿出來細胞瓶，先把里面的舊培養(yǎng)基倒或吸干凈（千萬別灑出來?。?，加2-3mL無菌PBS輕輕晃一晃，潤洗瓶底殘留的血清（血清會抑制胰酶活性?。缓蟮沟鬚BS。
3?? 胰酶消化
加1mL 0.25%胰酶，鋪滿瓶底就行(若感覺胰酶有點多可以倒出來一部分)，37℃孵箱放1-2min！重點來了?? 每隔30s拿出來晃一下，顯微鏡下看到細胞變圓、間隙變大，立刻加完全培養(yǎng)基終止消化?。ㄏ^度細胞直接死亡，血的教訓?。?/span>
4?? 吹打混勻
用移液管輕輕吹打瓶底和瓶壁，把細胞吹成單細胞懸液（溫柔點！別出氣泡）。
5?? 接種
按1:3或1:4的比例接種分到新的細胞瓶里，(注??若剛才加了3ml完全培養(yǎng)基，1：3比例傳代，則取出1ml細胞到新的細胞培養(yǎng)瓶即可。傳代比例指的是把原來的細胞分成了幾份，可根據(jù)傳代比例決定終止消化時加入的完全培養(yǎng)基的量。)補足培養(yǎng)基，晃勻后放回培養(yǎng)箱，搞定～