層析柱使用時間太長填料堵塞難清洗？
找不到合適體積的預裝柱？
和我一起來做層析空柱的填裝操作吧，讓你快速得到一個嶄新好用的層析柱！
?
第一步：選擇層析空柱
Cytiva有三種層析空柱，可以根據(jù)以下層析空柱的特點來進行選擇：
第二步：計算填料用量
根據(jù)公式計算填料的實際用量。壓縮因子為填料在裝填結(jié)束后被壓縮的比例。計算公式為：
柱管內(nèi)徑和最高可容納的柱床高度可從空柱說明書中查到，壓縮因子可查閱填料說明書和裝柱指南。
第三步：配制填料勻漿
（1）填料未拆分時，默認是以75%的填料濃度保存在20%乙醇中，實際裝柱時也可以使用靜置沉降法或者短暫離心查看懸液濃度；填料倒出前一定要搖勻，再倒入量筒中，經(jīng)過一段時間的沉降，可以查看準確的填料體積。
（2）將填料置換到裝柱緩沖液中?？墒褂贸闉V換液或者短暫離心的方法進行置換。裝柱緩沖液的成分可參考填料說明書或裝柱指南，常見緩沖液是氯化鈉溶液或氯化鈉-乙醇-水溶液，低濃度的氯化鈉可以防止填料在沉降過程中掛壁。
（3）添加裝柱緩沖液配制填料懸液。裝柱勻漿的濃度會根據(jù)柱管的內(nèi)徑和填料的粒徑有所區(qū)別，大致為40-60%，具體濃度亦可參考填料說明書或裝柱指南。
?
第四步：組裝層析空柱
組裝層析空柱，檢查各部件是否擰緊。在柱子頂端連接好裝柱器。在組裝完成后可以將裝柱器和空柱裝滿水后接入層析系統(tǒng)中，給予工作流速，檢查層析空柱是否有漏液情況。
第五步：倒入填料勻漿
擰緊填料下端堵頭，輕柔攪拌填料懸液，使用玻璃棒將填料勻漿緩慢一次性倒入空柱中。使用裝柱緩沖液補足裝柱器上端空余體積，蓋上裝柱器頂蓋；設(shè)定報警壓，將裝柱器和空柱接入層析系統(tǒng)中。
第六步：裝柱
在有流速的條件下填料沉降，柱床壓實。壓實一般分為兩個階段，第一階段恒定流速，第二階段恒定壓力。恒定流速階段，此時裝柱器連接在柱子上，柱管下端與大氣連接，隨著填料沉降，可觀察到壓力逐漸升高。恒定壓力階段，拆去裝柱器，將柱子下端接入層析系統(tǒng)中，設(shè)定壓力后，可觀察到隨柱床壓實，流速逐漸減慢至不再改變。裝柱流速和壓力參數(shù)參考填料說明書或者裝柱指南。
第七步：安裝柱頭
待流速穩(wěn)定，柱床不再繼續(xù)下降后，用馬克筆標注柱床位置，拆除裝柱器，用裝柱緩沖液補齊空柱上端體積，傾斜45度角安裝柱頭。對于XK柱和HiScale柱，將柱頭調(diào)節(jié)桿旋轉(zhuǎn)至標記線下1-2 mm的位置，擰緊其調(diào)節(jié)桿上端黑色部件，使密封圈充分膨脹。對于Tricorn柱，將填料上端濾膜放入柱管中，擰緊柱頭至調(diào)節(jié)桿壓實濾膜和柱床，壓下柱頭上方鎖扣。
第八步：柱效測定
裝填完成后，需要通過柱效測定評價層析柱的裝填效果，柱效測定的方法有兩種，一種是使用丙酮作為樣品，水作為流動相，測定紫外吸收峰，另一種是用0.8 M NaCl作為樣品，0.4 M NaCl作為流動相，測定電導峰值。
可手動運行柱效測定的流程，也可以通過方法編程進行自動運行。
在 Unicorn 軟件中的「method editor」模塊中，內(nèi)置了「column performance test」柱效測定方法模板，方法包含「equilibration」和「column performance test」兩個階段，填入流速、上樣體積等條件，在「System Control」模塊中運行程序。
柱效測定結(jié)束后，在「Evaluation」模塊中打開運行之后的結(jié)果，勾選「HETP」和「As」兩個參數(shù)，即可在表格中看到結(jié)果。當HETP除以填料粒徑≤ 3 ，0.8 < As < 1.8 時認為柱子裝填的效果較好。
如果有任何填裝參數(shù)找不到或者有層析空柱需要購買，請聯(lián)系您身邊的優(yōu)寧維銷售。
?
層析空柱列表
產(chǎn)品代碼
產(chǎn)品
空柱規(guī)格
帶一個適配器
帶兩個適配器
操作壓力
內(nèi)徑(mm)
高度(cm)
體積(mL)
柱床高度(cm)
體積(mL)
柱床高度(cm)
Column XK16/20
16?
20?
5-31
2.5-15
0-31
0-15.5
0.5 MR
Column XK16/40
40?
45-70
22.5-35
16-70
8-35
Column XK16/70
70?
105-130
52.5-65
76-130
38-65
Column XK16/100
100?
165-190
82.5-95
136-190
68-95
Column XK26/20
26?
20?
66?
1-12.5
0-66
0-12.5
0.5 MPa
Column XK26/40
40?
122-186
23-35
45-186
8.5-35
Column XK26/70
70?
285-344
53-65
204-344
38.5-65
Column XK26/100
100?
440-504
83-95
363-504
68.5-95
Column XK50/20
50?
18?
0-274
0-14
0-274
0-14
0.3 MPa
Column XK50/30
30?
265-559
13.5-28.5
0-559
0-28
Column XK50/60
60?
794-1088
40.5-55.5
500-1088
26-56
Column XK50/100
100?
1588-1862
81-95
1274-1862
65-95
Hiscale 10/40
10?
40?
-
-
8-31
10-40
2MPa
Hiscale 16/20
16?
20?
-
-
0-40
0-20
2MPa
Hiscale 16/40
40?
16-80
8-40
Hiscale 26/20
26?
20?
.-
-
0-106
0-20
2?MPa
Hiscale 26/40
40?
69-212
13-40
Hiscale 50/20
50?
20?
-
-
0-393
0-20
2 MPa
Hiscale 50/40
40?
274-785
14-40
TRICORN5/20
5?
2?
0.10-0.57
0.5-2.9
0.00-0.52
0-2.6
10 MPa
TRICORN5/50
5?
0.69-1.16
3.5-5.9
0.16-1.11
0.8-5.6
TRICORN 5/100
10?
1.67-2.14
8.5-10.9
1.15-2.09
5.8-10.6
TRICORN 5/150
15?
2.65-3.12
13.5-15.9
2.13-3.07
10.8-15.6
TRICORN 5/200
20?
3.63-4.11
18.5-20.9
3.11-4.05
15.8-20.6
TRICORN 10/20
10?
2?
0.00-2.29
0-2.9
0.00-2.07
0-26
5MPa
TRICORN 10/50
5?
2.29-4.64
2.9-5.9
0.00-4.43
0-56
TRICORN 10/100
10?
6.21-8.57
7.9-10.9
3.64-8.36
46-106
TRICORN 10/150
15?
10.14-12.50
12.9-15.9
7.57-12.28
96-156
TRICORN 10/200
20?
14.07-16.42
17.9-20.9
11.50-16.21
146-206
TRICORN 10/300
30?
21.92-24.28
27.9-30.9
19.35-24.06
246-306
TRICORN 10/600
60?
45.48-47.84
57.9-60.9
42.91-47.63
546-606