【阿拉丁】蛋白質(zhì)純化相關試劑：親和層析，精準分離

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咪唑

79.90 2024-04-15

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? ? ? ?親和層析是重組蛋白純化中的“王牌技術(shù)”，憑借其高選擇性、高純度和溫和操作，成為實驗室及工業(yè)級純化不可或缺的利器。無論是His標簽蛋白、GST融合蛋白，還是抗體類大分子，親和層析都能實現(xiàn)快速、穩(wěn)定的目標蛋白捕獲。

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? ? ? ?那么，親和層析實驗到底如何開展？需要哪些關鍵試劑？

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一套標準的His標簽蛋白親和純化流程如下

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步驟一：蛋白表達與裂解

? ? ? ?在大腸桿菌或哺乳動物細胞中表達目標蛋白后，使用裂解緩沖液進行細胞裂解。常搭配超聲或反復凍融，確保釋放蛋白質(zhì)。

步驟二：親和結(jié)合

? ? ? ?將裂解液加入Ni-NTA瓊脂糖柱（或磁珠、預裝柱），利用His標簽與Ni2?之間的螯合作用，使目標蛋白特異性結(jié)合。

● 推薦試劑：UltraBio? His-tag 純化樹脂、UltraBio? His標簽蛋白純化瓊脂糖磁珠（TED-Ni）、Ni親和層析預裝柱（阿拉丁官網(wǎng)具有多規(guī)格可選）

步驟三：洗脫雜蛋白

? ? ? ?洗滌緩沖液中加入低濃度咪唑（10–30 mM），去除非特異性結(jié)合蛋白，同時保留目標蛋白在柱上結(jié)合。

?步驟四：蛋白洗脫

? ? ? ?使用高濃度咪唑（250–500 mM）洗脫目標蛋白?？纱钆鋚H調(diào)節(jié)及NaCl調(diào)控，提升純化效率與蛋白活性。

● 推薦試劑：咪唑、Tris-鹽酸緩沖液、氯化鈉、甘油、DL-二硫蘇糖醇DTT

步驟五：蛋白緩沖液置換 / 濃縮

? ? ? ?經(jīng)親和洗脫后，目標蛋白可通過透析、離心濃縮或柱層析進行緩沖液更換，適應后續(xù)結(jié)構(gòu)或功能實驗。

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阿拉丁?親和層析產(chǎn)品優(yōu)勢

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★ 完整親和純化體系

? ? ? ?從親和填料（Ni-NTA介質(zhì)、Anti磁珠、預裝柱）到高純緩沖液組分（咪唑、Tris-鹽酸緩沖液、甘油等），全流程覆蓋，輕松實現(xiàn)純化標準化。

★ ?高純穩(wěn)定，適合多系統(tǒng)表達

? ? ? ?阿拉丁試劑純度高、蛋白兼容性強，適用于大腸桿菌、哺乳細胞、酵母等表達體系。

★ ?多規(guī)格靈活選擇

? ? ? ?適配科研、藥物開發(fā)與工藝優(yōu)化所需，提供小包裝到大包裝填料規(guī)格，以及緩沖液等。

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? ? ? ?從表達到洗脫，從實驗室到產(chǎn)業(yè)級，阿拉丁蛋白質(zhì)純化相關產(chǎn)品始終為您的分離之路保駕護航。

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部分親和層析相關產(chǎn)品

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貨號

產(chǎn)品名稱

包裝規(guī)格

級別和純度

H752721-FR

UltraBio? His-tag Purification Resin

10ml;100ml;1L

Fast Flow;

耐還原螯合型

T751558

UltraBio? His標簽

蛋白純化

瓊脂糖磁珠(TED-Ni)

2ml;10ml;50ml

UltraBio?

N5289

Ni親和層析預裝柱

1ml;5ml

i-Quip??

柱管材質(zhì):塑料;

粒徑:90μm;柱載量:

≥30mg肌紅蛋白/ml

I108706

咪唑

5g;25g;100g;500g

化學適用于

分子生物學,

≥99.5%純（CP）

T301499

Tris-鹽酸緩沖液

100ml;500ml

1M,pH 7.4 滅菌

C111547

氯化鈉

500g;2.5kg;12×500g

適用于分子生物學,

≥99.5%(AT)

G116208

甘油

100ml;250ml;1L;4L

適用于分子生物學,

≥99%

D104860

DL-二硫蘇糖醇(DTT)?

1g;5g;25g;100g

適用于分子生物學,

≥99%

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