1:從2D到3D的無縫銜接|曼博生物
PBS Mini中iPSC聚集體培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化攻略
在細(xì)胞治療從實(shí)驗(yàn)室走向臨床的進(jìn)程中,多能干細(xì)胞(PSC)的規(guī)模化、標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)始終是核心瓶頸。許多具備成熟2D PSC培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的研究者,在轉(zhuǎn)向3D懸浮放大時(shí),常常遭遇細(xì)胞擴(kuò)增效率低、批次間差異大、干性丟失、細(xì)胞庫資源消耗過快等難題。
作為PBS垂直輪生物反應(yīng)器的核心技術(shù)合作伙伴,曼博生物始終致力于為中國(guó)區(qū)生物制藥研究者提供從工藝開發(fā)到規(guī)?;a(chǎn)的技術(shù)支持方案?;赑BS Biotech近期發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)化工藝數(shù)據(jù),我們?yōu)榇蠹也鸾釶SC聚集體培養(yǎng)中較關(guān)鍵的2D種子培養(yǎng)環(huán)節(jié),助力您實(shí)現(xiàn)從2D到3D的平穩(wěn)過渡,打造穩(wěn)健、可重復(fù)的細(xì)胞治療生產(chǎn)工藝。
一、為什么2D種子培養(yǎng)是3D培養(yǎng)及放大的"基石"?
接種到生物反應(yīng)器中的細(xì)胞質(zhì)量決定了第三代培養(yǎng)的成功與否。在進(jìn)行3D培養(yǎng)之前,必須在2D培養(yǎng)中擴(kuò)增細(xì)胞,我們稱之為2D培養(yǎng)(2D Seed Train)。這一過程有幾個(gè)目的:
?首先是生產(chǎn)足夠數(shù)量的細(xì)胞,以便接種到大規(guī)模的培養(yǎng)體系如生物反應(yīng)器中;
?其次,通過減少所需細(xì)胞數(shù)量來保護(hù)母細(xì)胞庫資源;
?此外,還能幫助細(xì)胞在較低壓力的環(huán)境中恢復(fù)先前的保存狀態(tài),從而減少3D培養(yǎng)中的滯育時(shí)間;
?最后,避免在3D培養(yǎng)中多次傳代,這可能導(dǎo)致基因不穩(wěn)定性。

圖1.2D種子訓(xùn)練流程