Lipopolysaccharides（LPS，脂多糖），本品提取來源為大腸桿菌 O55:B5，是革蘭氏陰性菌外膜外葉天然內(nèi)毒素，分子由 O - 特異性抗原鏈、核心寡糖、脂質(zhì) A 三部分共價組裝而成，本品為細(xì)胞實驗專用高純免疫刺激試劑。采用細(xì)菌高密度發(fā)酵、熱酚水抽提、超速離心純化、核酸蛋白脫雜、透析除小分子雜質(zhì)、無菌凍干精制工藝制備，嚴(yán)格管控核酸殘留、菌體蛋白雜質(zhì)、多糖降解片段、重金屬、微生物雜菌，每批次 TLR4 激活活性、溶解度、細(xì)胞刺激穩(wěn)定性、遷移體誘導(dǎo)能力高度統(tǒng)一。本品外觀為淡黃色至白色疏松凍干粉末，無結(jié)塊、無霉點、無異味；易溶于無菌 PBS、無血清培養(yǎng)基，水溶液澄清無懸浮物；常溫避光短期穩(wěn)定，凍干固體耐儲存；作為經(jīng)典 PAMP 病原相關(guān)分子模式，可特異性激活免疫細(xì)胞 TLR-4 受體，具備穩(wěn)定炎癥誘導(dǎo)、免疫活化、細(xì)胞遷移體分泌誘導(dǎo)多重生物學(xué)活性，細(xì)胞體系兼容性強。本品廣泛應(yīng)用于免疫炎癥機制研究、TLR4 信號通路驗證、巨噬細(xì)胞 / 小膠質(zhì)細(xì)胞活化模型、細(xì)胞遷移體分泌調(diào)控、炎癥因子釋放檢測、膿毒癥體外細(xì)胞模型、天然免疫靶點篩選、高校免疫學(xué)教學(xué)實訓(xùn)等免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理藥理、新藥篩選領(lǐng)域。產(chǎn)品密封置于 - 20℃避光干燥保存，防潮、避光、避免反復(fù)凍融，遠離高溫、強堿、強變性試劑，規(guī)范儲存條件下保質(zhì)期 36 個月。
區(qū)別于普通粗提 LPS 產(chǎn)品，本款大腸桿菌 O55:B5 高純脂多糖脫蛋白脫核酸徹底，雜蛋白干擾極低，TLR4 激活活性穩(wěn)定，可穩(wěn)定誘導(dǎo)細(xì)胞遷移體分泌，批次刺激效應(yīng)均一，無需二次純化處理，可直接用于精密免疫細(xì)胞實驗、通路機制探究，是天然免疫、炎癥模型、遷移體研究領(lǐng)域標(biāo)桿級標(biāo)準(zhǔn)刺激試劑。
二、作用機制
1、TLR4 特異性天然免疫激活機制LPS 脂質(zhì) A 結(jié)構(gòu)為核心活性區(qū)域，作為典型 PAMP 病原相關(guān)分子模式，特異性識別免疫細(xì)胞膜表面 TLR4 受體，協(xié)同 MD2、CD14 共受體形成復(fù)合物，啟動胞內(nèi)信號級聯(lián)反應(yīng)，激活 NF-κB、MAPK 等經(jīng)典炎癥通路，誘導(dǎo)免疫細(xì)胞活化。2、三重結(jié)構(gòu)協(xié)同炎癥放大機制完整分子包含 O - 特異性抗原鏈、核心寡糖、脂質(zhì) A 三段結(jié)構(gòu)，完整多糖鏈可提升 LPS 水溶性與細(xì)胞結(jié)合效率，脂質(zhì) A 負(fù)責(zé)核心受體激活，三者協(xié)同放大炎癥信號，穩(wěn)定誘導(dǎo) TNF-α、IL-6、IL-1β 等多種促炎因子大量釋放。3、細(xì)胞遷移體分泌誘導(dǎo)調(diào)控機制LPS 持續(xù)刺激免疫細(xì)胞、上皮細(xì)胞后，通過 TLR4 下游炎癥信號重塑細(xì)胞骨架、調(diào)控胞內(nèi)囊泡轉(zhuǎn)運通路，顯著促進細(xì)胞遷移體合成與胞外釋放，為遷移體形成、轉(zhuǎn)運、生理病理功能研究提供穩(wěn)定誘導(dǎo)模型。4、低雜雜質(zhì)低干擾實驗維穩(wěn)機制精制工藝去除菌體蛋白、核酸等雜刺激物，消除非特異性細(xì)胞應(yīng)激、非特異通路激活干擾，僅保留 TLR4 專一性刺激效應(yīng)，實驗背景低、數(shù)據(jù)重復(fù)性強，適配高靈敏度多因子檢測、轉(zhuǎn)錄組測序等精密實驗。5、廣譜細(xì)胞兼容刺激機制
理化性質(zhì)溫和，僅特異性激活天然免疫通路，無廣譜細(xì)胞毒性，適用于巨噬細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、上皮細(xì)胞等多種細(xì)胞類型，可適配短期刺激、長時間炎癥造模等不同實驗方案。
三、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1、TLR4 天然免疫通路機制研究作為標(biāo)準(zhǔn)陽性刺激物，激活 TLR4 信號軸，用于 NF-κB、MAPK 等通路蛋白表達、磷酸化檢測、報告基因驗證，解析天然免疫識別分子機制。2、體外炎癥細(xì)胞模型構(gòu)建刺激巨噬細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞建立炎癥細(xì)胞模型，用于抗炎藥物、免疫調(diào)節(jié)劑體外藥效篩選，檢測促炎因子、趨化因子分泌水平。3、細(xì)胞遷移體分泌與功能研究特異性誘導(dǎo)各類細(xì)胞遷移體釋放，用于遷移體提取、表征、內(nèi)容物分析、遷移體介導(dǎo)細(xì)胞間通訊相關(guān)機制探究。4、膿毒癥、內(nèi)毒素相關(guān)病理研究構(gòu)建體外內(nèi)毒素?fù)p傷細(xì)胞模型，模擬革蘭氏陰性菌感染引發(fā)的炎癥風(fēng)暴，支撐膿毒癥、臟器損傷保護相關(guān)藥理評價。5、免疫靶點與小分子藥物高通量篩選作為陽性對照刺激劑，用于免疫抑制、抗炎候選化合物高通量篩選、靶點驗證、化合物作用通路確證。6、免疫學(xué)教學(xué)與科研實訓(xùn)
用于免疫細(xì)胞分離培養(yǎng)、炎癥造模、細(xì)胞因子檢測、天然免疫識別等教學(xué)實驗，刺激活性穩(wěn)定，實驗結(jié)果重現(xiàn)性優(yōu)異。
四、使用方法與注意事項
使用方法
免疫細(xì)胞炎癥造模：精準(zhǔn)稱量凍干 LPS，無菌 PBS 溶解配制 1–10 mg/mL 母液，0.22μm 濾膜除菌，細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至工作濃度（常規(guī) 100 ng/mL–1 μg/mL），加入細(xì)胞培養(yǎng)體系避光孵育對應(yīng)時間后檢測；遷移體誘導(dǎo)實驗：采用低濃度梯度 LPS 持續(xù)刺激細(xì)胞 6–24 h，收集細(xì)胞上清或細(xì)胞樣本，完成遷移體分離、染色、定量分析；通路驗證實驗：按實驗方案設(shè)置濃度梯度刺激細(xì)胞，提取蛋白、RNA，開展 Western blot、qPCR、多因子流式檢測。
注意要點
本品凍干粉末吸濕性較強，開封后快速分裝凍存，反復(fù)凍融會降低 TLR4 激活活性，影響遷移體誘導(dǎo)效率；水溶液穩(wěn)定性差，母液建議現(xiàn)配現(xiàn)用或分裝 - 20℃避光保存，避免常溫長時間放置降解失活；LPS 屬于內(nèi)毒素刺激性物質(zhì)，操作全程佩戴手套、口罩、護目鏡，避免粉末吸入、皮膚黏膜大面積接觸；僅限實驗室體外細(xì)胞、分子科研使用，嚴(yán)禁動物大劑量直接注射、人體接觸、臨床及食品相關(guān)應(yīng)用；若粉末出現(xiàn)吸水結(jié)塊、溶解后溶液渾濁，代表雜質(zhì)析出或活性降解，禁止用于精密通路、遷移體定量實驗；
本品經(jīng)深度脫雜精制，無蛋白核酸干擾，無需預(yù)處理，稱量后可直接配制母液使用。
五、總結(jié)與展望
大腸桿菌 O55:B5 來源高純 LPS 脂多糖依托完整三段式天然分子結(jié)構(gòu)、TLR4 專一免疫激活、穩(wěn)定誘導(dǎo)細(xì)胞遷移體分泌、低雜蛋白低核酸干擾、廣譜細(xì)胞適配、批次活性統(tǒng)一等核心優(yōu)勢，成為天然免疫通路研究、體外炎癥模型構(gòu)建、遷移體機制探索、抗炎藥物篩選領(lǐng)域核心標(biāo)準(zhǔn)刺激試劑。有效解決粗提 LPS 雜蛋白污染、非特異性激活、刺激活性不穩(wěn)定、遷移體誘導(dǎo)效果參差不齊等行業(yè)痛點，全面覆蓋高校免疫實驗室、藥企藥理研發(fā)平臺、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究院、第三方活性篩選機構(gòu)各類科研需求。依托本品搭建的 TLR4 免疫激活體系、體外炎癥細(xì)胞模型、遷移體誘導(dǎo)研究平臺，廣泛支撐感染免疫、神經(jīng)炎癥、膿毒癥防護、胞外囊泡通訊、抗炎新藥研發(fā)等前沿科研項目。隨著天然免疫、胞外囊泡、炎癥靶向藥物研究持續(xù)深入，大腸桿菌 O55:B5 高純 LPS 將在免疫機制解析、細(xì)胞遷移體功能探索、抗炎候選分子評價領(lǐng)域持續(xù)發(fā)揮關(guān)鍵工具試劑作用，為免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、藥理篩選研究提供刺激活性穩(wěn)定、雜質(zhì)可控、批次高度一致的標(biāo)準(zhǔn)化內(nèi)毒素試劑保障。