一、 試劑盒簡介

本試劑盒是簡單快速從單細胞到cDNA的一步法試劑盒，無需復雜的RNA提取步驟，就可以從1-1000個細胞中獲得cDNA。因為細胞數(shù)少，RNA比較少，所以本試劑盒是將逆轉錄和預擴增同時進行。只需預先設計預擴增引物，就可以獲得高質量的cDNA。

二、 產品組分

三、 保存條件

此試劑盒建議置于-20℃冰箱中保存。

四、試劑盒特點

1、簡單、快速：僅需2步即可得到高質量的cDNA。

2、所需樣品少：最低可提取單個細胞。

3、安全無毒：不使用苯酚、氯仿、異丙醇、DEPC水等對身體有害的物質。

四、 預擴增引物設計

1、 建議qPCR引物和預擴增引物在設計時靠近mRNA的3^，端，以便確保被充分擴增。

2、 預擴增引物和qPCR引物進行跨內含子設計：即其擴增產物跨1個內含子。

3、 需要將qPCR擴增產物所在的序列包含在內（即預擴增引物需要在qPCR引物的外側，上游更偏5^，端，下游更偏3^，端）。

五、 注意事項

1、本試劑盒是專為qPCR設計的，盡量不要用于基因克隆。

2、細胞從培養(yǎng)箱中取出后建議放在室溫，切勿放在冰上，以免影響細胞狀態(tài)。

3、Cell Lysis Buffer解凍后，需顛倒幾次使之充分混勻，再放在冰上以備使用，請勿渦旋振蕩。

4、如果qPCR結果內參Ct值明顯偏大，則預擴增循環(huán)數(shù)可以由14個Cycle增加3個Cycle到17個Cycle。