胞漿-3-磷酸甘油脫氫酶(ctGPD)活性試劑盒微板法/96樣
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
胞漿-3-磷酸甘油脫氫酶(ctGPD,EC 1.1.1.8)的酶活水平直接決定了葡萄糖分解代謝過程中向甘油合成方向的物質(zhì)流分配量,也因此決定甘油的生成水平。ctGPD 為 NAD 依賴型,催化磷酸二羥丙酮生成 3-磷酸甘油。通過 340nm 下測(cè)定 NADH的下降量,進(jìn)而得出 ctGPD 的酶活性大小。
試劑盒組成和配制:
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存要求 | 備注 |
提取液 | 液體100mL×1瓶 | 4℃保存 |
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試劑一 | 粉劑 mg×3 支 | -20℃保存 | 用前甩幾下或離心使粉劑落入底部,每支分別加 0.44mL 蒸餾水溶解備用。用不完的試劑-20℃保存,禁止反復(fù)凍融,三天內(nèi)用完。 |
試劑二 | 液體 17mL×1 瓶 | 4℃保存 |
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試劑三 | 粉劑 mg×1 支 | 4℃保存 | 用前甩幾下或離心使粉劑落入底部,加1.1mL 蒸餾水充分溶解。 |
所需的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)試移液器、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、研缽、冰和蒸餾水。
胞漿-3-磷酸甘油脫氫酶(ctGPD)活性測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
樣本制備:
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.5g)到研缽內(nèi),加入 1mL 提取液,在冰上進(jìn)行冰浴勻漿或者液氮研磨。 12000rpm ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
[注]:也可以按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1 :5~10 的比例提取。
② 細(xì)菌/真菌樣本:
先收集細(xì)菌/真菌到離心管內(nèi),離心后棄上清;取 500 萬細(xì)菌/真菌加入1mL 提取液;冰
浴超聲波破碎細(xì)菌/真菌(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm, 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
[注]:也可按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000 :1 的比例
進(jìn)行提取。
③ 液體樣本:澄清的液體樣本直接檢測(cè),若渾濁則離心后取上清液檢測(cè)。
關(guān)鍵字: ctGPD試劑盒 ; ctGPDELISA KIT ; ctGPDELISA試劑盒 ;
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