為評價高純度雷鮑迪甙A(reb A,99.16%)作為食品配料的細胞毒性,采用四氮唑基比色法(MTT)、乳酸脫氫酶法(LDH)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、實時熒光定量PCR(qPCR)、高效液相色譜法(HPLC)和二維電泳法(2-DE)檢測雷鮑迪甙A的細胞毒性在人體細胞HT-29和T84上,以及來自小鼠的肝臟和脾臟細胞。結果表明,當使用不同濃度的萊鮑迪甙A時,試驗組和對照組的細胞活力、炎性細胞因子產量和蛋白質產量均未發(fā)生明顯變化,表明雷鮑迪甙A在試驗濃度范圍(0.001-0.5%)下體外無細胞毒性。
為了滿足對天然高效甜味劑日益增長的需求,以減少食品和飲料中的卡路里,我們已將目光投向了甜菊糖苷。在這項工作中,我們報告了使用葡萄糖基轉移酶將萊鮑迪甙A生物轉化為萊鮑迪甙I。這種生物轉化反應增加了一個具有 1→3 鍵的糖單元。我們利用 1D 和 2D NMR 波譜(1H、13C、COSY、HSQC-DEPT、HMBC、1D TOCSY 和 NOESY)和質譜數(shù)據(jù)來全面表征萊鮑迪甙 I。
萊鮑迪甙 A 是來自甜葉菊的天然甜味劑,其中四個 β-D-吡喃葡萄糖單元連接到糖苷配基甜菊醇上。其在吡啶-d(5)中的(1)H和(13)C NMR譜圖采用1D和2D方法分配。使用源自 ROESY 交叉峰的 NMR 約束對溶劑化萊鮑迪甙進行約束分子動力學,得出了 β-D-吡喃葡萄糖單元的取向。使用羥基化學位移的溫度系數(shù)、ROESY和長程COSY光譜以及質子-質子耦合常數(shù)檢查了氫鍵。
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劉盼盼