產(chǎn)品描述

CellROX Deep Red Reagent是一種用于檢測活細胞或固定細胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平的熒光探針，由西安強化生物科技開發(fā)。

該探針通過響應(yīng)活性氧（ROS，如超氧陰離子、羥基自由基等）產(chǎn)生熒光信號，其氧化形式在深紅/遠紅外光譜區(qū)呈現(xiàn)可檢測的熒光，可用于多色熒光實驗，減少與其他常見熒光染料（如FITC、Cy5）的光譜重疊。

該試劑具有可接受的光穩(wěn)定性，可用于實時或長時間監(jiān)測細胞內(nèi)ROS水平。

使用方法

需要自行準(zhǔn)備的材料

細胞和培養(yǎng)基

生理鹽緩沖液（PBS，pH 7.2-7.6）

【可選】固定劑（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）

實驗步驟

實驗可用于任何細胞類型。

生長培養(yǎng)基、細胞密度、細胞類型變化和其他因素可能會影響標(biāo)記效率。在初始實驗，建議設(shè)置濃度梯度，以確定實驗條件和適合研究細胞類型的工作濃度。

CellROX Deep RedReagent對光和空氣敏感，使用過程中切記不可長時間敞開瓶蓋。當(dāng)瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。

用待測化合物處理細胞，孵育一定時間。

【注】：待測化合物處理后沒有必要去除培養(yǎng)基。 加CellROX Deep RedReagent到細胞內(nèi)使其終濃度為5μM，37℃孵育30min。 去除培養(yǎng)基，用PBS清洗3次。

【可選】可用3.7%甲醛固定細胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h內(nèi)進行熒光信號檢測。

【可選】此時可用NucBlue活細胞染料（一種細胞核復(fù)染劑）或其他復(fù)染劑如Hoechst 33342對細胞染色。

注意事項

濃度調(diào)整：需根據(jù)細胞類型調(diào)整濃度，避免染色過量或背景干擾。

對照設(shè)置：建議使用ROS清除劑（如NAC）驗證信號特異性。

儀器要求：需配備遠紅光濾光片（如Cy5通道）或633 nm激光器（可用于流式細胞儀）。

該試劑對光和空氣敏感，使用過程中不可長時間敞開瓶蓋。當(dāng)瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。