產(chǎn)品描述
CellROX Deep Red Reagent是一種用于檢測活細(xì)胞或固定細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平的熒光探針,由西安強化生物科技開發(fā)。
該探針通過響應(yīng)活性氧(ROS,如超氧陰離子、羥基自由基等)產(chǎn)生熒光信號,其氧化形式在深紅/遠紅外光譜區(qū)呈現(xiàn)可檢測的熒光,可用于多色熒光實驗,減少與其他常見熒光染料(如FITC、Cy5)的光譜重疊。
該試劑具有可接受的光穩(wěn)定性,可用于實時或長時間監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)ROS水平。
使用方法
需要自行準(zhǔn)備的材料
細(xì)胞和培養(yǎng)基
生理鹽緩沖液(PBS,pH 7.2-7.6)
【可選】固定劑(比如,溶于PBS的3.7%甲醛)
實驗步驟
實驗可用于任何細(xì)胞類型。
生長培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、細(xì)胞類型變化和其他因素可能會影響標(biāo)記效率。在初始實驗,建議設(shè)置濃度梯度,以確定實驗條件和適合研究細(xì)胞類型的工作濃度。
CellROX Deep RedReagent對光和空氣敏感,使用過程中切記不可長時間敞開瓶蓋。當(dāng)瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。
用待測化合物處理細(xì)胞,孵育一定時間。
【注】:待測化合物處理后沒有必要去除培養(yǎng)基。 加CellROX Deep RedReagent到細(xì)胞內(nèi)使其終濃度為5μM,37℃孵育30min。 去除培養(yǎng)基,用PBS清洗3次。
【可選】可用3.7%甲醛固定細(xì)胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h內(nèi)進行熒光信號檢測。
【可選】此時可用NucBlue活細(xì)胞染料(一種細(xì)胞核復(fù)染劑)或其他復(fù)染劑如Hoechst 33342對細(xì)胞染色。
注意事項
濃度調(diào)整:需根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整濃度,避免染色過量或背景干擾。
對照設(shè)置:建議使用ROS清除劑(如NAC)驗證信號特異性。
儀器要求:需配備遠紅光濾光片(如Cy5通道)或633 nm激光器(可用于流式細(xì)胞儀)。
該試劑對光和空氣敏感,使用過程中不可長時間敞開瓶蓋。當(dāng)瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵字: DCFH-DA;HPF羥苯基熒光素;
西安強化生物科技有限公司位于陜西省西安市未央?yún)^(qū),傳承十三朝古都?xì)v史文化底蘊,融合西安“開放包容、務(wù)實創(chuàng)新”的地域文化基因,秉持“科技創(chuàng)新驅(qū)動發(fā)展,產(chǎn)學(xué)研協(xié)同共贏”的核心理念,依托由多名博士組建的專業(yè)研發(fā)團隊,聚焦高新生物制品、醫(yī)藥中間體及生物催化材料研發(fā),為制藥企業(yè)及科研機構(gòu)提供從克級到公斤級的產(chǎn)品定制開發(fā)、工藝優(yōu)化及質(zhì)量檢測服務(wù)。
通過深度聯(lián)動西安交通大學(xué)、西北大學(xué)等高??蒲匈Y源,公司構(gòu)建“基礎(chǔ)研究-技術(shù)開發(fā)-產(chǎn)業(yè)應(yīng)用”全鏈條協(xié)同體系,重點突破酶工程、合成生物學(xué)等領(lǐng)域技術(shù)瓶頸。依托未央?yún)^(qū)生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)集聚優(yōu)勢,持續(xù)推動生物制造技術(shù)轉(zhuǎn)化,踐行"科技賦能醫(yī)藥未來"的企業(yè)使命。