葡萄糖氧化酶（GOD）試劑盒說明書
微量法 100管/48樣
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生H2O2，是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。
測定原理：
GOD催化產(chǎn)生H2O2，過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在500 nm有特征吸收峰，顏色深淺與GOD活性成線性關(guān)系。
組成：
產(chǎn)品名稱 | OX010-100T/48S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
緩沖液：液體 | 30ml | 4℃ |
試劑一：粉劑 | 1瓶 | -20℃ |
試劑二：粉劑 | 1瓶 | -20℃ |
說明書 | 一份 |
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入10ml緩沖液充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存一個月；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入10ml緩沖液充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存一個月；
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水
樣本的前處理：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至500nm，蒸餾水調(diào)零。
試劑一和試劑二的配制：參見試劑的組成和配制。
3、煮沸樣本的準備：取200μl樣本至新的EP管中，95℃水浴10min，冷卻至室溫后，8000g 4℃離心10min，取上清作為對照管的煮沸樣本待測。
4、測定操作表
試劑（μl） | 對照管 | 測定管 |
樣本 |
| 50 |
煮沸樣本 | 50 |
|
試劑一 | 75 | 75 |
試劑二 | 75 | 75 |
混勻，35℃保溫15min后，于500nm波長處讀取吸光度。ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設一個對照管。
GOD活力單位的計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
回歸方程為y = 2.8348x - 0.0169；x為H2O2標準品濃度（μmol/ml），y為ΔA。
1、血清（漿）GOD活力的計算
單位定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/ml）= (ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷V樣÷T×1000=58.8×(ΔA+0.0169)
2、細菌、細胞或組織GOD活力的計算
（1）按蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/mg prot）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷(V樣×Cpr) ×1000÷T
=58.8×(ΔA+0.0169)÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/g鮮重）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷(W×V樣÷V樣總) ×1000÷T
=58.8×(ΔA+0.0169)÷W
（3）按細菌或細胞密度計算
單位定義：每一萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/104 cell）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷(500×V樣÷V樣總) ×1000÷T
=0.118×(ΔA+0.0169)
V反總：反應體系總體積，0.125ml； V樣：加入樣本體積，0.05ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應時間，15 min； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500萬。
b.用96孔板測定的計算公式如下
回歸方程為y = 1.4174x - 0.0169；x為H2O2標準品濃度（μmol/ml），y為ΔA。
1、血清（漿）GOD活力的計算
單位定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/ml）= (ΔA+0.0169) ÷1.4174×V反總÷V樣÷T×1000=118×(ΔA+0.0169)
2、細菌、細胞或組織GOD活力的計算
（1）按蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/mg prot）=(ΔA+0.0169) ÷1.4174×V反總÷(V樣×Cpr) ×1000÷T
=118×(ΔA+0.0169)÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/g鮮重）=(ΔA+0.0169) ÷1.4174×V反總÷(W×V樣÷V樣總) ×1000÷T
=118×(ΔA+0.0169)÷W
（3）按細菌或細胞密度計算
單位定義：每一萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個酶活力單位。
GOD（nmol/min/104 cell）=(ΔA+0.0169) ÷1.4174×V反總÷(500×V樣÷V樣總) ×1000÷T
=0.235×(ΔA+0.0169)
V反總：反應體系總體積，0.125ml； V樣：加入樣本體積，0.05ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應時間，15 min； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500萬。
關(guān)鍵字： 葡萄糖氧化酶（GOD）檢測試劑盒;
伊勢久（江蘇連云港）生物科技有限責任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測、病理檢測和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運行，其中包括150平米的超十萬級的潔凈車間。我司堅持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷市場以來收到了客戶的廣泛好評。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標桿企業(yè)。堅持以客戶為中心，致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務，始終是我們努力的目標和方向。