檢測(cè)原理
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。預(yù)先包被抗大鼠C4抗體的微孔板中依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品及HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體，經(jīng)溫育洗滌后，通過(guò)TMB顯色系統(tǒng)催化產(chǎn)生顏色反應(yīng)，顏色深度與樣本中C4濃度呈正相關(guān)。最終在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算濃度。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠補(bǔ)體成分4(C4)ELISA試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Rat C4 ELISA Kit |
分類(lèi) | Rat/大鼠Elisa試劑盒 | 檢測(cè)范圍 | 6.25ng/mL-400ng/mL |
靈敏度 | 3.125ng/mL | 貨號(hào) | PR33164 |
技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)范圍：0.5–16 μmol/L（具體以實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)品梯度為準(zhǔn)）
靈敏度：最低檢測(cè)濃度<0.1 μmol/L
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間變異系數(shù)<15%
有效期：6個(gè)月（生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝標(biāo)簽）
保存條件：2–8℃避光保存，避免反復(fù)凍融
試劑盒組成
| 組分名稱(chēng) | 96孔配置 | 48孔配置 |
| 包被微孔板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5） | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 |
| HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體 | 10mL | 5mL |
| 底物A/B | 各6mL | 各3mL |
| 終止液 | 6mL | 3mL |
| 20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL |
樣本要求
適用樣本：血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞上清液等
樣本體積：50–100μL/孔
樣本處理：避免溶血或反復(fù)凍融，2–8℃短期保存，長(zhǎng)期需-20℃以下凍存
操作步驟
平衡與加樣：
微孔板室溫平衡20分鐘，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔及空白孔。
標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品50μL，樣本孔加入待測(cè)樣本50μL。
孵育：
每孔加入HRP標(biāo)記抗體100μL，37℃孵育60分鐘。
洗滌：
棄液后拍干，每孔加滿1×洗滌液（350μL），靜置1分鐘，重復(fù)5次。
顯色與終止：
每孔加入底物A/B各50μL，37℃避光孵育15分鐘。
加入終止液50μL，15分鐘內(nèi)測(cè)定450nm OD值。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)前需將所有試劑平衡至室溫，避免產(chǎn)生冷凝水。
洗滌過(guò)程需徹底，避免殘留影響結(jié)果。
若樣本濃度超出檢測(cè)范圍，建議稀釋后復(fù)測(cè)。
質(zhì)量控制
建議每次實(shí)驗(yàn)設(shè)置復(fù)孔，取平均值計(jì)算。
標(biāo)準(zhǔn)曲線R2值應(yīng)≥0.99，否則需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用范圍
本試劑盒僅限科研使用，不適用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 大鼠補(bǔ)體成分4;C4;ELISA試劑盒;
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