大鼠補體成分4(C4)elisa試劑盒
1. 檢測原理

采用雙抗體夾心ELISA技術，特異性識別大鼠補體C4的α鏈（95kDa）。預包被抗大鼠C4單抗捕獲完整C4分子（205kDa），生物素標記的二抗通過鏈霉親和素-HRP系統(tǒng)催化TMB顯色，450nm吸光度值與C4濃度正相關。

2. 核心組分

組分  規(guī)格  保存條件  關鍵特性

預包被板  96T  2-8℃（含干燥劑）  抗α鏈單抗（克隆號：MAB641）

C4標準品  0-200μg/mL  -20℃  純化大鼠血清C4凍干粉

檢測抗體  120μL  -20℃（避光）  生物素標記抗β鏈抗體

EDTA抗凝管  10支  室溫  專用補體保存管

補體滅活劑  5mL  4℃  56℃ 30分鐘滅活用

3. 性能參數(shù)

檢測范圍：1.56-100μg/mL（可擴展至500μg/mL）

靈敏度：0.4μg/mL（基于2SD空白值）

 樣本類型：

最佳：新鮮血清（避免凍融）

可選：肝組織勻漿（1:9稀釋）

交叉反應：

大鼠C4：100%

小鼠C4：<5%

人C4：<0.1%

精密度：

批內CV：4.2-6.8%

批間CV：7.5-9.3%

4. 樣本處理規(guī)范

4.1 血清采集

使用預冷EDTA管采集全血

立即冰浴，4℃ 1500×g離心15分鐘

分裝后-80℃保存（僅凍融1次）

4.2 肝組織處理

取100mg肝右葉

加入900μL冷PBS（含10mM EDTA）

超聲破碎（冰浴，20kHz，3×5秒脈沖）

4.3 特殊處理

補體活性檢測：樣本需用GVB++緩沖液稀釋

滅活對照：56℃水浴30分鐘

5. 實驗操作要點

標準曲線制備

梯度稀釋：0、1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100μg/mL

復溶液：含5mM EDTA的PBS

關鍵步驟

孵育溫度：嚴格控制在37±0.5℃

洗板液：含0.01% Tween-20的VB緩沖液

顯色時間：精確控制15±0.5分鐘

質控要求

空白OD值：≤0.08

最低檢測限回收率：85-115%

溶血樣本需備注（Hb>0.1mg/mL）

6. 主要應用方向

肝病研究：肝硬化模型補體消耗

自身免疫?。篠LE樣綜合征監(jiān)測

移植排斥：補體激活程度評估

感染模型：細菌感染后補體動態(tài)

7. 注意事項

樣本特殊性

避免使用反復凍融樣本（C4易降解）

溶血樣本需超速離心（10000×g，10分鐘）

標準曲線

推薦log-log擬合

要求R2≥0.985

異常處理

100μg/mL樣本需1:5稀釋重測

異常低值需復查采集過程

公司正在出售的產(chǎn)品：