人肺腺癌耐順鉑株帶熒光素酶;A549/DDP/LUC (STR)
產品信息:

A549/DDP/LUC細胞是一種經過基因工程改造的細胞系,基于人肺腺癌A549細胞衍生的耐順鉑(DDP)株(A549/DDP)進一步轉入熒光素酶(Luciferase)基因而構建。以下是其詳細說明、培養(yǎng)操作和特性:
產品名稱 | 人肺腺癌耐順鉑株帶熒光素酶;A549/DDP/LUC (STR) | 英文名稱 | A549/DDP/LUC:A549DDPLUC |
貨號 | AXB10019 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞背景與特性
來源與構建:A549細胞源自人肺腺癌組織,A549/DDP是通過長期暴露于順鉑誘導的耐藥株,而A549/DDP/LUC則是在此基礎上轉入熒光素酶基因,用于生物發(fā)光成像(BLI)研究1
耐藥性:對順鉑具有顯著耐藥性,可用于研究肺癌耐藥機制及篩選逆轉耐藥的藥物
熒光素酶表達:攜帶熒光素酶基因,可在加入底物熒光素(Luciferin)后發(fā)出生物熒光,適用于活體成像、細胞增殖、轉移及藥物療效評估等研究
2. 培養(yǎng)操作
培養(yǎng)基:推薦使用含10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素(如青霉素/鏈霉素)的RPMI 1640培養(yǎng)基。
培養(yǎng)條件:37℃、5% CO、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
傳代步驟:
當細胞密度達到80%-90%時,棄去培養(yǎng)上清,用無鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入2 mL胰酶(0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA)消化細胞,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,顯微鏡下觀察細胞變圓并脫落。
加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打細胞,收集細胞懸液。
1000 RPM離心4分鐘,棄去上清,加入新鮮培養(yǎng)基重懸細胞。
按1:2至1:4的比例傳代至新的培養(yǎng)瓶中。
凍存與復蘇:
凍存:細胞密度達到80%-90%時,用胰酶消化細胞,離心收集細胞沉淀,重懸于含10% DMSO和90%凍存培養(yǎng)基(如FBS)的凍存液中,分裝至凍存管,標記后置于程序降溫盒中,放入-80℃冰箱過夜,最終轉移至液氮罐中長期保存。
復蘇:從液氮中取出凍存管,迅速放入37℃水浴中融化,離心收集細胞沉淀,棄去凍存液,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,接種至培養(yǎng)瓶中,置于37℃、5% CO培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3. 應用
耐藥機制研究:探究順鉑耐藥相關分子機制,如藥物外排泵、DNA修復能力等。
藥物篩選與評價:篩選逆轉耐藥的化合物或天然產物,評估新藥對耐藥腫瘤細胞的療效。
腫瘤生物學研究:利用熒光素酶報告系統(tǒng)研究細胞增殖、凋亡、侵襲和轉移等生物學行為。
活體成像:通過生物發(fā)光成像技術實時監(jiān)測腫瘤生長、轉移及治療反應,適用于動物模型研究。
基本操作步驟:

原代培養(yǎng):取材→分離→培養(yǎng),需保持材料新鮮及嚴格無菌2。
傳代培養(yǎng):貼壁細胞需胰酶消化,懸浮細胞可直接傳代,離心后重懸分瓶23。
凍存與復蘇:使用含10%DMSO的凍存液,程序降溫后液氮保存;復蘇時快速37℃水浴解凍。
培養(yǎng)操作要點:

基礎培養(yǎng)基選擇:分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基(如DMEM、RPMI 1640)和無血清培養(yǎng)基45。目前以合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基使用居多。
培養(yǎng)條件設置:
溫度:多數人和哺乳動物細胞為36-37℃,昆蟲細胞為27℃。
pH值:多數哺乳動物細胞為7.4,昆蟲細胞為6.2。
CO?濃度:通常維持5-7% CO?,多數細胞適合5% CO?氣氛。
滲透壓:控制在260-320mOsm/kg為宜。
公司正在出售的產品:
KAT13D 英文名稱: 生物鐘KAT13D蛋白抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh RAIDD CASP2凋亡相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Metronidazole(1C2) 甲硝唑單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml | Rhesus antibody Rh GKRP 葡萄糖激酶調節(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
TGF Beta 1 英文名稱: 轉化生長因子β1抗體(TGFβ1) 0.1ml | Anti-MIP4/CCL18/FITC 熒光素標記巨噬細胞蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
C19orf71 英文名稱: 19號染色體開放閱讀框71抗體 0.1ml | ABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三0酸結合盒轉運體A1抗原 0.5mg |
GBF1 英文名稱: 蛋白轉運抑制劑GBF1抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh KDM1 組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1抗體 規(guī)格 0.1ml |
BetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit 人β葡萄糖醛酸苷酶 | IFIT1B 英文名稱: 干擾素誘導的三角形四肽重復蛋白1B抗體 0.2ml |
4-Chloro-1-Naphthol Stainning Kit 氯酚染色試劑盒 kit | FN(Mouse Fibronectin) ELISA Kit 小鼠纖連蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
GPBB 英文名稱: 腦糖原0酸化酶抗體 0.2ml | Anti-phospho-CBL2(Tyr731) 0酸化原癌蛋白CBL2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
CAMK 2 ELISA Kit 大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | 人肺腺癌耐順鉑株帶熒光素酶;A549/DDP/LUC (STR)ASB3 英文名稱: 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體 0.2ml |
Anti-NGFR/p75NTR 神經生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | Rhesus antibody Rh TOPO II/TOPO II Alpha DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體 規(guī)格 0.1ml |
具體特點如下:

環(huán)境與營養(yǎng):需無菌環(huán)境、精確的溫度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),動物細胞常需血清,植物細胞需激素。
生長方式:貼壁細胞需表面附著,懸浮細胞自由漂浮,半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度:貼壁細胞需胰酶消化傳代,懸浮細胞直接分瓶;密度達80%-90%時需傳代,避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性:對剪切應力、污染、溫度變化敏感,需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應用與局限:便于活細胞觀察與實驗控制,但體外環(huán)境與體內存在差異,長期傳代可能導致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關鍵字: A549/DDP/LUC;人肺腺癌耐順鉑株帶熒光素酶;貼壁細胞;
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