人永生化表皮細胞/角質(zhì)形成細胞+LUC；hacat+LUC
產(chǎn)品信息：
人永生化表皮細胞/角質(zhì)形成細胞+LUC（HaCaT+LUC）是一種經(jīng)過基因改造的細胞系，源自正常成人皮膚的角質(zhì)形成細胞，通過轉(zhuǎn)染熒光素酶（Luciferase, LUC）基因，使其能夠表達熒光素酶，從而用于生物發(fā)光成像和相關(guān)研究。以下是其詳細說明、培養(yǎng)操作和特性：
產(chǎn)品名稱 | 人永生化表皮細胞/角質(zhì)形成細胞+LUC；hacat+LUC | 英文名稱 | LUChacat+LUC：LUChacatLUC |
貨號 | AXB10166 | 生長特性 | 貼壁生長 |
特性/操作 詳細信息
細胞來源與特性 源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，經(jīng)體外培養(yǎng)后自然轉(zhuǎn)化為人永生化角質(zhì)形成細胞（HaCaT），具有無限增殖能力，保留角質(zhì)形成細胞分化特性，但不具有致瘤性。
通過基因工程手段轉(zhuǎn)入熒光素酶（Luciferase, LUC）基因，可在特定底物（如熒光素）存在下發(fā)出生物熒光，用于實時監(jiān)測細胞活性、基因表達或信號通路研究。
細胞呈上皮細胞樣形態(tài)，貼壁生長，表達角蛋白等角質(zhì)形成細胞標志物。
培養(yǎng)基 DMEM高糖培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素（PS）。
培養(yǎng)條件 37℃、5% CO、飽和濕度。
傳代方法 細胞密度達80%-90%時進行傳代。
用0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化1-3分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落即終止消化。
離心收集細胞，按1:2至1:4比例分瓶傳代。
凍存與復(fù)蘇 凍存液為90%FBS+10%DMSO，程序降溫后液氮保存。
復(fù)蘇時37℃水浴快速解凍，加入完全培養(yǎng)基稀釋DMSO，離心后重懸接種。
應(yīng)用領(lǐng)域 用于皮膚生物學、氧化應(yīng)激、細胞增殖與凋亡等領(lǐng)域的機制研究。
通過熒光素酶報告系統(tǒng)，可用于基因表達調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導、藥物篩選及細胞間相互作用等研究。
HaCaT+LUC細胞系因其永生化特性、熒光素酶報告系統(tǒng)和易于培養(yǎng)的特點，成為研究皮膚生物學和相關(guān)疾病機制的重要工具。在培養(yǎng)過程中，需注意維持適宜的培養(yǎng)條件和操作規(guī)范，以確保細胞的正常生長和熒光素酶活性。
基本操作步驟：
原代培養(yǎng)：取材→分離→培養(yǎng)，需保持材料新鮮及嚴格無菌2。
傳代培養(yǎng)：貼壁細胞需胰酶消化，懸浮細胞可直接傳代，離心后重懸分瓶23。
凍存與復(fù)蘇：使用含10%DMSO的凍存液，程序降溫后液氮保存；復(fù)蘇時快速37℃水浴解凍。
培養(yǎng)操作要點：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基選擇：分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基（如DMEM、RPMI 1640）和無血清培養(yǎng)基45。目前以合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基使用居多。
培養(yǎng)條件設(shè)置：
溫度：多數(shù)人和哺乳動物細胞為36-37℃，昆蟲細胞為27℃。
pH值：多數(shù)哺乳動物細胞為7.4，昆蟲細胞為6.2。
CO?濃度：通常維持5-7% CO?，多數(shù)細胞適合5% CO?氣氛。
滲透壓：控制在260-320mOsm/kg為宜。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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Phospho-TSC2(Ser664) 英文名稱： 0酸化性硬化蛋白抗體 0.1ml | C6orf204 英文名稱： 6號染色體開放閱讀框204抗體 0.2ml |
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具體特點如下：
環(huán)境與營養(yǎng)：需無菌環(huán)境、精確的溫度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），動物細胞常需血清，植物細胞需激素。
生長方式：貼壁細胞需表面附著，懸浮細胞自由漂浮，半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度：貼壁細胞需胰酶消化傳代，懸浮細胞直接分瓶；密度達80%-90%時需傳代，避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性：對剪切應(yīng)力、污染、溫度變化敏感，需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應(yīng)用與局限：便于活細胞觀察與實驗控制，但體外環(huán)境與體內(nèi)存在差異，長期傳代可能導致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關(guān)鍵字： hacat+LUC;人永生化表皮細胞/角質(zhì)形成細胞+LUC;貼壁細胞;
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