NHEK(正常人表皮角質形成細胞)
產品信息:

NHEK(正常人表皮角質形成細胞)是來源于人表皮的上皮細胞樣細胞系,主要負責皮膚屏障功能和表皮再生,廣泛應用于皮膚生理、病理及化妝品安全評估研究。
產品名稱 | NHEK(正常人表皮角質形成細胞) | 英文名稱 | NHEK:NHEK |
貨號 | AXB9856 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞特性
種屬來源:人(表皮組織)
形態(tài)特征:上皮細胞樣,多角形,邊緣不規(guī)則,貼壁生長
生長特性:有限增殖能力,需特定誘導因子維持分化狀態(tài)
生物安全等級:1級
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO?,95%空氣,濕度70%-80%
推薦培養(yǎng)基:EMEM培養(yǎng)基+10%胎牛血清(FBS)+1%雙抗(青霉素-鏈霉素)
培養(yǎng)操作
復蘇方法:
從液氮中取出凍存管,迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
將細胞懸液轉移至含4-6mL預熱完全培養(yǎng)基的離心管中,1000rpm離心3-5分鐘。
棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,接種至T25培養(yǎng)瓶中,加入6-8mL培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)過夜。
傳代方法:
當細胞密度達到80%-90%時,棄去舊培養(yǎng)基,用PBS潤洗細胞1-2次。
加入1-2mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分鐘,鏡下觀察細胞變圓并脫落時,加入完全培養(yǎng)基終止消化。
輕輕吹打細胞,使其完全脫落并均勻分布,離心收集細胞后按1:2比例分瓶,補充新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
凍存方法:
收集對數生長期細胞,離心后棄上清,用無血清凍存液(如90%FBS+10%DMSO)重懸細胞,調整密度至1×1 0?/mL以上。
分裝至凍存管中,使用程序降溫盒逐步降溫,先置于-80℃冰箱過夜,24小時后轉入液氮罐長期保存。
注意事項
無菌操作:全程嚴格無菌操作,避免污染。
細胞狀態(tài)觀察:定期在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度,及時換液和傳代。
運輸與保存:細胞運輸過程中注意溫度控制,收到細胞后盡快復蘇培養(yǎng),避免長時間放置。

基本操作步驟:

原代培養(yǎng):取材→分離→培養(yǎng),需保持材料新鮮及嚴格無菌2。
傳代培養(yǎng):貼壁細胞需胰酶消化,懸浮細胞可直接傳代,離心后重懸分瓶23。
凍存與復蘇:使用含10%DMSO的凍存液,程序降溫后液氮保存;復蘇時快速37℃水浴解凍。
培養(yǎng)操作要點:

基礎培養(yǎng)基選擇:分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基(如DMEM、RPMI 1640)和無血清培養(yǎng)基45。目前以合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基使用居多。
培養(yǎng)條件設置:
溫度:多數人和哺乳動物細胞為36-37℃,昆蟲細胞為27℃。
pH值:多數哺乳動物細胞為7.4,昆蟲細胞為6.2。
CO?濃度:通常維持5-7% CO?,多數細胞適合5% CO?氣氛。
滲透壓:控制在260-320mOsm/kg為宜。
公司正在出售的產品:
CCDC18 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白18抗體 0.2ml | Anti-MMP-10 基質金屬蛋白酶-10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit 人12羥二十烷四烯酸 | AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 人乙酰膽堿受體抗體 |
Cathepsin G 英文名稱: 組織蛋白酶G抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh HMW Kininogen 高分子量激肽原重鏈抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HOXB4 HOXB4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | MAP-9 英文名稱: 微管相關蛋白9抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh RANK/CD265 核轉錄因子NF-κB受體抗體(核因子kB受體活化因子) 規(guī)格 0.1ml | AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪細胞增強結合蛋白1 0.5mg |
RRAGC 英文名稱: RAS相關GTP結合蛋白C抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh RANK/CD265 核轉錄因子NF-κB受體抗體(核因子kB受體活化因子) 規(guī)格 0.1ml |
VEGFR2 英文名稱: 內皮生長因子受體2抗體 0.1ml | Anti-CCL16/HCC-4/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎性蛋白16抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
phospho-ABCA1 (Ser2054) 英文名稱: 0酸化腺苷三0酸結合盒轉運體A1抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh PCDHB5 原鈣粘蛋白β5抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-phospho-c-Raf (Ser259) 0酸化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | NHEK(正常人表皮角質形成細胞)Anti-NBS1/FITC 熒光素標記DNA修復蛋白NBS1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
HABP ELISA Kit 大鼠透明質酸結合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | Rhesus antibody Rh PDZK1 PDZ結構域PDZK1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
具體特點如下:

環(huán)境與營養(yǎng):需無菌環(huán)境、精確的溫度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),動物細胞常需血清,植物細胞需激素。
生長方式:貼壁細胞需表面附著,懸浮細胞自由漂浮,半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度:貼壁細胞需胰酶消化傳代,懸浮細胞直接分瓶;密度達80%-90%時需傳代,避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性:對剪切應力、污染、溫度變化敏感,需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應用與局限:便于活細胞觀察與實驗控制,但體外環(huán)境與體內存在差異,長期傳代可能導致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關鍵字: NHEK;正常人表皮角質形成細胞;貼壁細胞;
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