氨基比林-N-去甲基化酶(AND)測(cè)定試劑盒/分光光度法/24樣
測(cè)定意義：
細(xì)胞色素 P450 酶是一組在外源物質(zhì)代謝中，尤其是藥物和毒物，具有重要作用的酶系。AND作為 P450 酶系的重要一員，相當(dāng)于 CYP3A4 亞型，與藥物的去甲基化反應(yīng)密切相關(guān)。
測(cè)定原理：
AND 催化氨基比林釋放甲醛，通過(guò) Nash 比色法測(cè)定甲醛含量，即可計(jì)算出 AND 活性。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、普通離心機(jī)，超速離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水、無(wú)水乙醇和冰。
AND 活性測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min ，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 412 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于 37℃水浴中預(yù)熱 30min。
3. 對(duì)照管：取 1 支 EP 管，加入 50μL 粗酶液，850μL 試劑二，50μL 試劑三，50μL 蒸餾水，混勻后置于37℃水浴保溫30min；立即加入 175μL 試劑五，混勻后置于冰浴中 5min；取出后加入 175μL 試劑六，混勻后室溫靜置 5min；室溫 8000rpm 離心 5min；取新的 EP 管，加入 500μL 上清液，500μL 試劑七，混勻后水浴 10min，然后取出，用冷水冷卻 5min ，于 412nm 測(cè)定光吸收，記為 A 對(duì)照管。
4. 測(cè)定管：取 1 支 EP 管，加入 50μL 粗酶液，850μL 試劑二，50μL 試劑三，50μL 試劑四，混勻后置于37℃水浴保溫30min；立即加入 175μL 試劑五，混勻后置于冰浴中 5min；取出后加入 175μL 試劑六，混勻后室溫靜置 5min；室溫 8000rpm 離心 5min；取 1 支新 EP 管，加入 500μL 上清液，500μL 試劑七，混勻后60℃水浴 10min，然后取出，用冷水冷卻 5min ，于 412nm 測(cè)定光吸收，記為 A 測(cè)定管。
5. 標(biāo)準(zhǔn)管：取 1 支 EP 管，加入 500μL 標(biāo)準(zhǔn)品，500μL 試劑七，混勻后 60℃水浴 10min，然后取出，用冷水冷卻 5min ，于 412nm 測(cè)定光吸收，記為 A 標(biāo)準(zhǔn)管。
注 意：
正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
關(guān)鍵字： AND試劑盒 ; AND ELISA KIT ; AND ELISA試劑盒 ;
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