斯氏普羅威登斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 斯氏普羅威登斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Providencia stuartii Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR3430 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒為斯氏普羅威登斯菌（Providencia stuarti）染料法熒光定量PCR檢測(cè)專(zhuān)用，適用于科研領(lǐng)域（不可用于臨床診斷）。采用SYBR Green染料技術(shù)，通過(guò)特異性引物靶向斯氏普羅威登斯菌保守基因區(qū)域，實(shí)現(xiàn)高靈敏度、高特異性的核酸定量檢測(cè)，線性范圍覆蓋至少5個(gè)數(shù)量級(jí)。
產(chǎn)品組分
| 成分 | 規(guī)格 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL |
| 熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液 | 1 mL |
| 斯氏普羅威登斯菌qPCR引物混合液 | 100 μL |
| 超純水 | 1 mL（用于稀釋?zhuān)?|
| 陽(yáng)性對(duì)照（1×10^6拷貝/μL）| 50 μL（可選） |
| 使用手冊(cè) | 1份 |
技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)類(lèi)型：定性/定量檢測(cè)（定量線性范圍≥5個(gè)數(shù)量級(jí)）。
反應(yīng)體系：20 μL/次，總次數(shù)50次。
擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度：約200 bp（需使用1.5%-2.0%瓊脂糖凝膠驗(yàn)證）。
靈敏度：可檢測(cè)低至100拷貝/反應(yīng)的模板。
特異性：引物針對(duì)斯氏普羅威登斯菌專(zhuān)屬序列設(shè)計(jì)，無(wú)交叉反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)流程
樣本制備
需設(shè)置N+2個(gè)提取反應(yīng)（N=待測(cè)樣本數(shù)，額外2個(gè)為陰陽(yáng)性對(duì)照）。
陽(yáng)性對(duì)照：10 μL陽(yáng)性對(duì)照（1×10^6拷貝/μL）加水至樣本體積。
陰性對(duì)照：使用超純水。
推薦兼容市售細(xì)菌DNA提取試劑盒純化樣本。
PCR擴(kuò)增
按20 μL體系配制反應(yīng)液（含2×qPCR MagicMix、引物混合液及模板DNA）。
閉管操作，避免交叉污染。
結(jié)果分析
電泳驗(yàn)證：取5-10 μL擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳（1.5%-2.0%凝膠），陽(yáng)性樣本應(yīng)出現(xiàn)200 bp條帶。
陰性對(duì)照要求：若陰性對(duì)照出現(xiàn)擴(kuò)增，表明污染，實(shí)驗(yàn)需重做。
注意事項(xiàng)
儲(chǔ)存條件：組分需-20℃保存，避免反復(fù)凍融。引物干粉使用前需短暫離心并溶解于165 μL超純水。
質(zhì)量控制：每次實(shí)驗(yàn)必須包含陰陽(yáng)性對(duì)照。
應(yīng)用限制：僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 斯氏普羅威登斯菌;染料法熒光定量;RT-PCR試劑盒;
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