多胺氧化酶（Polyamine oxidase，PAO）試劑盒說明書
分光光度法 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
多胺氧化酶是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶，通過調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度，參與各種植物體對逆境脅迫的反應(yīng)和生長發(fā)育過程。
測定原理：
PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫，在過氧化氫酶存在的條件下與底物顯色，在550nm下有特征吸收峰，通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。
組成：
產(chǎn)品名稱 | AO030-50T/48S | Storage |
試劑一：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 6ml | 4℃ |
試劑三：液體 | 3ml | 4℃ |
試劑四：液體 | 3ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
自備儀器和用品：
分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取：
組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心20min，取上清，置冰上待測。
細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
血清等液體：直接測定。
測定步驟：
分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至550nm，蒸餾水調(diào)零。
樣本測定
試劑名稱（μl） | 測定管 |
試劑一 | 700 |
試劑二 | 100 |
試劑三 | 50 |
樣本 | 100 |
試劑四 | 50 |
迅速混勻，于550nm下測定初始吸光值A(chǔ)1與30min后吸光值A(chǔ)2。ΔA=A2-A1。 |
PAO活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位定義：每mg組織蛋白在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個酶活力單位。
PAO（U/mg prot）＝ΔA×V反總÷（V樣×Cpr）÷0.002÷T =166.67×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位定義：每g組織在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個酶活力單位。
PAO（U/g 鮮重）＝ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.002÷T =166.67×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個酶活力單位。
PAO（U/104 cell）＝ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.002÷T =0.333×ΔA
按液體體積計(jì)算
單位的定義：每ml液體樣本在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個酶活力單位。
PAO（U/ml）=ΔA×V反總÷V樣÷0.002÷T =166.67×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；V樣：加入樣本體積，0.1 ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應(yīng)時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬。
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關(guān)鍵字： 多胺氧化酶;多胺氧化酶(PAO);試劑盒;
伊勢久（江蘇連云港）生物科技有限責(zé)任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測、病理檢測和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行，其中包括150平米的超十萬級的潔凈車間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷市場以來收到了客戶的廣泛好評。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶為中心，致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù)，始終是我們努力的目標(biāo)和方向。