馬源性成分陽性對照

一、陽性對照基本屬性

產(chǎn)品類型：馬(Equus caballus)源性DNA標準物質(zhì)

適用檢測：馬源性成分熒光PCR檢測試劑盒

濃度標示：10?拷貝/μL(經(jīng)數(shù)字PCR絕對定量)

溯源信息：

來源：馬肌肉組織標準樣本(NCBI Taxonomy ID: 9796)

認證：通過CNAS標準物質(zhì)認證(GB/T 27411-2012)

二、核心特征參數(shù)

分子特征：

靶序列：線粒體CYTB基因(GenBank登錄號：NC_001640.1)

片段長度：126bp(包含檢測試劑盒引物結(jié)合區(qū))

GC含量：42.3%

性能指標：

純度：A260/A280=1.82±0.05

穩(wěn)定性：-20℃保存≥24個月，凍融耐受≤5次

均一性：批內(nèi)CV<3%(n=10)

三、制備工藝流程

原料處理：

選用SPF級馬肌肉組織

液氮速凍后機械粉碎

核酸制備：

酚-氯仿法提取基因組DNA

瓊脂糖凝膠電泳純化目標片段

定量標準化：

納米滴定量初步標定

數(shù)字PCR絕對定量校準

分裝凍干(每管20μL)

四、質(zhì)量控制體系

表：質(zhì)控項目與標準

檢測項目   方法   接受標準

濃度驗證   ddPCR   9.8×10?-1.1×10?拷貝/μL

物種特異性   BLAST   僅匹配馬屬序列

無菌檢測   培養(yǎng)法   無微生物生長

抑制物檢測   加標回收   回收率≥95%

五、使用注意事項

解凍程序：

室溫平衡10分鐘后輕柔混勻

避免劇烈震蕩產(chǎn)生氣泡

工作液配制：

推薦用試劑盒配套稀釋液

梯度稀釋時更換槍頭

實驗應(yīng)用：

每批檢測需包含2個濃度水平(103和10?拷貝/μL)

擴增曲線應(yīng)為典型S型(Ct值±1在預(yù)期范圍內(nèi))

失效特征：

液體變渾濁或有沉淀

凍干粉溶解不完全

連續(xù)3次檢測Ct值偏移>2個周期

公司正在出售的產(chǎn)品：