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非洲豬瘟病毒(ASFV)野毒株與基因缺失株檢測試劑盒(三重熒光-PCR法)是一種基于多重熒光定量PCR技術的分子診斷工具,用于快速、準確區(qū)分ASFV野毒株與基因缺失株(如CD2v和/或MGF360-505R基因缺失株)。以下是其詳細說明及操作特點:
產品名稱 | 非洲豬瘟病毒(ASFV)野毒株與基因缺失株檢測試劑盒(三重熒光-PCR 法) | 檢測方法 | 熒光PCR法 |
貨號 | XG-P1413 | 應用范圍 | 核酸的定性檢測 |
規(guī)格 | 50T | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
檢測原理
基于三重熒光定量PCR技術,通過三組特異性引物和探針(靶向ASFV的P72、CD2v和MGF360-505R基因)同時擴增三個基因。利用不同熒光通道(FAM、VIC、Cy5)檢測各基因的擴增情況,根據(jù)CT值和擴增模式區(qū)分野毒株與基因缺失株。
產品特點

高特異性與靈敏度:可準確鑒別野毒株與基因缺失株,最低檢測限達5-10拷貝/μL,減少假陽性/陰性。
多重檢測優(yōu)勢:一次反應同時檢測三個基因,成本降低約2/3,檢測時間縮短。
操作簡便:封閉式反應體系,污染概率低,適合自動化平臺。
結果可靠:結合內參質控和陽性/陰性對照,確保實驗有效性。
操作流程

樣本準備:采集血液、組織(脾臟、淋巴結)等樣本,提取DNA模板。
反應體系配置:將DNA模板與試劑盒提供的三重PCR反應液、引物探針預混液混合。
擴增與檢測:置于熒光定量PCR儀,運行特定程序(如95℃預變性5分鐘;45個循環(huán):95℃變性15秒,60℃退火延伸1分鐘),實時收集熒光信號。
結果分析:根據(jù)CT值(如P72基因CT≤38為陽性,CD2v基因CT≥40提示缺失)和擴增曲線,綜合判定毒株類型。
應用領域

臨床診斷:輔助鑒別ASFV野毒株與基因缺失株感染,指導防控措施。
養(yǎng)殖場監(jiān)測:用于豬場疫情篩查、疫苗株監(jiān)控及生物安全評估。
科研領域:支持ASFV流行病學研究和基因缺失株特性分析。
注意事項

嚴格分區(qū)操作(試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)),避免交叉污染。
每次實驗設置陰性、陽性對照,確保結果可靠性。
試劑需避光保存于-20℃,避免反復凍融。
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關鍵字: 非洲豬瘟病毒;檢測試劑盒;三重熒光法;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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