羥自由基清除能力測定試劑盒/微量法/96S
測定意義:
羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。
測定原理:
H2O2/ Fe2+ 通過 Fenton 反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中 Fe2+氧化為 Fe3+ ,導(dǎo)致 536nm 吸光度下降,樣品對 536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。
自備儀器和用品:
恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96 孔板和蒸餾水。操作步驟:1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min ,調(diào)節(jié)波長至 536nm。
2、工作液配制:使用之前按照每管試劑一:試劑二:試劑三=100:50:100 (μL)的比例配制,用多少配多少,混勻。
3、在 EP 管中加入如下試劑。
空白管
對照管
測定管
工作液(μL)
250
混勻,防止局部顏色過濃
樣品(μL)
50
試劑四(μL)
H2O (μL)
100
混勻,37℃保溫 60min ,8000g 25℃離心 5min ,吸取 200μL 于 96 孔板中測定 536nm 處吸光值,空白管、對照管和測定管的吸光值分別記為 A 空、A 對和 A 測。
注 意:
正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
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